بهبود عملكرد قارچ دكمه‌اي سفيد با استفاده از روش گزينش تك‌اسپوري به كمك نشانگر AFLP

Improvement of white Button Mushroom Yield by AFLP Marker-assisted Single Spore Selection Method

قارچ دكمه‌ای سفید Agaricus bisporus، یكی از قارچ‌های رشته‌ای با اهمیت اقتصادی بالا است. پایداری جدایه‌های این قارچ برای تولیدكنندگان اسپاون و قارچ اهمیت بالایی دارد. در واحدهای تولیدی نژادهای مادری عمدتاً به‌صورت واكشت‌های مكرر بر روی محیط‌كشت غنی تكثیر می‌شوند، كه رشد غیر متعارف و عملكرد ضعیف از پیامدهای این امر می‌باشد. دلایل این موضوع تاكنون ناشناخته مانده است. استفاده از نشانگرهای مولكولی یكی از راه‌های ارزیابی و شناخت تغییرات ژنتیكی است. در این مطالعه برای اولین بار از نشانگر تكرارپذیر AFLP برای ارزیابی تغییرات ژنتیكی و كمك به گزینش جدایه‌های تك‌اسپور برتر نژادی تجاری (Holland737) قارچ دكمه‌ای استفاده گردید. 30 جدایه تك‌اسپوری مورد مطالعه از لحاظ سرعت رشد و عملكرد متنوع بودند، وراثت الگوی باندی نشانگر AFLP نیز وجود این تنوع را تأیید نمود. 9 جفت تركیب آغازگری، 353 باند تولید كرد كه از این میان 53 باند در میان 19 جدایه تك‌اسپور به‌صورت چند شكل بودند. نتایج این تحقیق، كارآیی روش گزینش تك‌اسپوری در به‌نژادی این قارچ را مورد تأیید قرار داد. دو جدایه به‌طور متوسط 47 درصد نسبت به نژاد مادری افزایش عملكرد داشتند. هم¬چنین مشخص گردید كه نشانگر AFLP، حساسیت كافی برای شناسایی چندشكلی ژنتیكی جدایه‌های تك‌اسپوری را دارا می‌باشد.

The white button mushroom, Agaricus bisporus, is a commercially important cultivated filamentous fungus. Strain stability is of great importance to both spawn producers and mushroom growers. Mushroom strains are usually propagated via vegetative method on nutritionally rich substrates. Abnormal growth and poor yield ‎are the consequences of this replication method. The reason for this phenomenon is still unknown. The use of molecular markers is one way of assessing and understanding the genetic changes. In this study, for the first time we reported the application of amplified fragment length polymorphism (AFLP) marker to assess genetic variation in single spore progeny and to assist selection of superior cultivars based upon the use of monosporous cultures of A. bisporus commercial strain, Holland737. We isolated 30 single spores that differed in growth rate, productivity and AFLP inheritance pattern. Nine EcoRI / TaqI primer combinations identified a total of 353 AFLP bands from 19 single-spore isolates, of which 53 were polymorphic. Results showed that the single spore selection is an effective method for strain improvement in A. bisporus, so that two isolates averagely performed 47% increased yield over the maternal strain and AFLP showed enough sensitivity to detect polymorphisms among single spore isolates.