بررسي اثر آگونيست -آدرنرژيكي ايزوپروترنول بر بيان miR-886-3p و miR-23a در سلول?هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان انسان

The Effect of -Adrenergic Agonist Isoproterenol on miR-886-3p and miR-23a Expression in Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells

زمينه و هدف: تاكنون در مطالعات مختلفي به?بررسي موبيليزاسيون سلول?هاي بنيادي خونساز به?منظور پيوند و اهميت سيگنال?هاي ?-آدرنرژيكي در القاي اين فرآيند، پرداخته شده است. با اين وجود، اطلاعات كمي درباره‌ي نحوه‌ي اثر اين سيگنال?ها در موبيليزاسيون سلول?هاي بنيادي خونساز، موجود?است. كموكاين SDF-1 كه توسط سلول?هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان انسان توليد?مي?گردد، در روند موبيليزاسيون سلول?هاي بنيادي خونساز، نقش كليدي ايفا مي?كند. همچنين مشخص شده كه miR-886-3p و miR-23a در تنظيم بيان SDF-1 در سلول?هاي مذكور، موثر هستند. در اين تحقيق به?منظور بررسي نقش miR-886-3p و miR-23a در فرآيند موبيليزاسيون، ميزان بيان كمي هردو miRNA مذكور در طي تيمار سلول?هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان انسان با آگونيست ?- آدرنرژيكي ايزوپروترنول، مورد ارزيابي قرار گرفت. روش بررسي: سلول?هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان انسان جداسازي و كشت شده و پس از تاييد فلوسيتومتري، تحت تيمار پيوسته با 100 ميكرومولار ايزوپروترنول قرار?گرفتند. استخراج RNA Total در ساعات 12 و 48 تيمار و هم?چنين از سلول?هاي بنيادي مزانشيمي تيمار نشده به?عنوان كنترل، انجام گرفت. بيان كمي miR-886-3p و miR-23a با روش Quantitative Reverse Transcriptase PCR سنجيده شد. يافته?ها: بيان miR-886-3p در ساعات 12 و 48 تيمار افزايش داشت كه در هر دو حالت، اين اختلاف به لحاظ آماري معني?دار بود (P < 0/05). بيان miR-23a نيز در طي تيمار سلول?هاي بنيادي مزانشيمي با ايزوپروترنول در ساعت 12 تيمار نسبت به?حالت كنترل كاهش يافته و سپس در ساعت 48 پس از تيمار، افزايشي معني?دار را نشان داد (P < 0/05). نتيجه?گيري: ايزوپروترنول بيان miR-886-3P را در سلول?هاي بنيادي مزانشيمي انسان، القا مي?كند. miR-23a نيز عليرغم كاهشي اوليه، تحت اثر القايي ايزوپروترنول قرار گرفته و لذا هر دو miRNA مذكور مي?توانند، از عوامل دخيل در موبيليزاسيون باشند. واژگان كليدي: سلول?هاي بنيادي مزانشيمي، miR-886-3p و miR-23a- ايزوپروترنول

Background and Objective: Mobilization of Hematopoietic Stem Cells (HSCs) for transplantation and the importance of ?-adrenergic signals in induction of this process have been well investigated. However, little is known about the role of ?-adrenergic signals in mobilization of HSCs and factors influenced by these signals. The Chemokine Stromal Derived Factor -1 (SDF-1) which is expressed by human bone marrow-derived mesenchymal stem cells (hMSCs), has a key role in mobilization of HSCs. In addition, miR-886-3p and miR-23a can regulate the expression of SDF-1 in hMSCs. In this study, to investigate the role of miR-886-3p and miR-23a in mobilization process, expression of both miRNAs was evaluated in hMSCs treated by Isoproterenol (a ?-adrenergic agonist). Materials and Methods: hMSCs were isolated from human bone marrow and cultured. Following flowcytometric analysis, the cells were treated with 100 M isoproterenol. Total RNA was extracted at 12 and 48 hours post treatment, and also from untreated hMSCs as control. Then, miR-886-3p and miR-23a expression levels were quantified by quantitative Reverse Transcriptase PCR. Results: The expression level of miR-886-3p increased significantly at 12 and 48 hours post treatment (P < 0.05). In addition, the expression level of miR-23a decreased at 12 hours post treatment and increased significantly at 48 hours post treatment (P < 0.05). Conclusion: Isoproterenol induces miR-886-3p in hMSCs. MiR-23a is primarily decreased, and then increased due to treating with isoproterenol. So both miRNAs can contribute to mobilization process. Key words: Mesenchymal Stem Cells - miR-886-3p - miR-23a - Isoproterenol