افزايش اثرات درماني سيس پلاتين و 5- فلورواوراسيل بر روي رده‌هاي سلولي AGS و KYSE-30 با استفاده از تيمار تركيبي رتينوييك اسيد تمام ترانس

All-Trans Retinoic Acid Combination with Cisplatin and 5-Fluorouracil Enhance Cytotoxic Effect on AGS and KYSE-30 Cell Lines

زمينه و هدف: رتينوييك اسيد اثرات قابل ملاحظه‌اي بر روي تنظيم رشد سلولي، تمايز و آپوپتوز دارد. مطالعات اخير نشان دهنده‌ي افزايش مقاومت سلول‌هاي آدنوكارسينوماي معده و كارسينوم سلول‌هاي سنگفرشي مري نسبت به داروهاي شيمي درماني سيس پلاتين و 5-فلورواوراسيل مي‌باشد. لذا در اين مطالعه اثرات سميتي تيمار تركيب رتينوييك اسيد تمام ترانس با داروهاي سيس پلاتين و 5-فلورواوراسيل بر روي رده‌هاي سلولي سرطان مري و معده بررسي شد. روش‌ بررسي: رده‌هاي سلولي آدنوكارسينوم معده (AGS) و كارسنيوم سلول سنگفرشي مري (KYSE-30) به مدت شش روز در محيط كشت RPMI-1640 حاوي غلظت‌هاي زير سميت (به‌ترتيب 6/3 و 6/13 ميكرومول) رتينوييك اسيد كشت داده شدند و پس از 72 ساعت تحت تيمار با داروهاي سيس پلاتين و 5-فلورواوراسيل قرار گرفتند. اثرات تيمار تركيبي با روش‌هاي تعيين فعاليت متابوليكي، رنگ آميزي آكريدين اورنج/ اتيديوم برومايد و فلوسايتومتري بررسي شدند. يافته‌ها: ارزيابي IC50 با روش فعاليت متابوليكي نشان داد تيمار تركيبي اثرات سميتي بيشتري بر روي هر دو رده سلولي داشت و با كاهش مقادير IC50 داروها همراه بود. (05/0, P < 001/0P < ) رنگ آميزي آكريدين اورنج / اتيديوم برومايد نشان دهنده افزايش درصد سلول‌هاي آپوپتوز در گروه تيمار تركيبي نسبت به استفاده تنها از داروها بود. (05/0, P < 001/0 P < ) علاوه بر آن، تيمار تركيبي رتينوييك اسيد با سيس پلاتين باعث افزايش توقف سلول‌ها در فاز G2/M و تيمار تركيبي رتينوييك اسيد با 5-فلورواوراسيل باعث افزايش توقف در فاز G1/S شد (001/0P < ) نتيجه‌گيري: نتايج ما نشان داد تيمار تركيبي غلظت‌هاي زير سميت رتينوييك اسيد با داروهاي سيس پلاتين و 5-فلورواوراسيل موجب افزايش اثرات سميتي اين داروها بر روي رده‌هاي سلولي AGS و KYSE-30 مي‌شود. واژگان كليدي: رتينوييك اسيد تمام ترانس، سيس پلاتين، 5-فلورواوراسيل، رده سلولي AGS، رده سلولي KYSE-30

Background and Objective: All-trans retinoic acid (ATRA), a derivative of vitamin A, exerts fundamental effects on regulation of cell growth, differentiation and apoptosis. Recent studies have shown an increase in resistance of gastric adenocarcinoma and squamous cell carcinoma to cisplatin and 5-fluorouracil. In this study, we investigated a combination treatment of ATRA with cisplatin and 5-fluorouracil on gastric (AGS) and esophageal (KYSE-30) cancer cell lines. Materials and Methods: KYSE-30 and AGS cell lines were cultured in RPMT-1640, including sub-toxic concentration of ATRA (13.6 and 3.6µM respectively) for 6 days and then they were treated with cisplatin and 5-fluorouracil for 72h. The effects of combination treatment were tested by MTT assay, ethidium bromide/acridine orange (EB/AO) staining and flow cytometry. Results: Determination of IC50 (Inhibitory concentration of 50%) with MTT assay showed that combination treatment had cytotoxic effect on both cell lines. IC50 value of the combined drugs was lower than the IC50 of drugs alone (p < 0/05). The percentage of apoptotic cells increased in comparison to drugs alone in EB/AO staining (p < 0/05). Furthermore, there was an indication that the combination of ATRA with cisplatin caused increased cell cycle arrest at G2/M in AGS and KYSE-30 cells. Also, ATRA and 5FU induced enhanced cell cycle arrest at G1/S phase in KYSE-30 and AGS cells (p < 0/001). Conclusion: Our findings demonstrate that sub-toxic concentration of combination treatment of ATRA with cisplatin and 5-fluorouracil induces further cytotoxic effects on KYSE-30 and AGS cancer cell lines. Keywords: All-trans-retinoic acid, Cisplatin, 5-Fluorouracil, KYSE-30 cell line, AGS cell line