تشخيص متالوبتالاكتامازها، بتالاكتامازهاي با طيف وسيع و پورين‌هاي غشا خارجي در ايزوله‌هاي كلبسيلا پنومونيه جدا شده از بيماران بستري در بيمارستان‌هاي شهر تهران

Detection of Metallo-beta-Lactamases, Extended-spectrum Beta-lactamases (ESBLs), Outer Membrane Porins among Klebsiella Pneumoniae Strains Isolated from Hospitalized Patients in Tehran

زمينه و هدف: كلبسيلا پنومونيه يكي از موارد مهم عفونت?هاي اكتسابي از جامعه و بيمارستان است. اين باكتري يكي از شايع?ترين پاتوژن?هاي بيمارستاني است كه ميزان مرگ و مير ناشي از آن بالا مي?باشد. افزايش ظهور مقاومت چند دارويي در بين ايزوله?هاي بيمارستاني كلبسيلا پنومونيه، گزينه?هاي درماني براي درمان عفونت?هاي ايجاد شده بوسيله اين باكتري را محدود كرده است لدا، هدف از اين مطالعه شناسايي متالوبتالاكتامازها، بتالاكتامازهاي با طيف وسيع، پورين?هاي غشا خارجي در ايزوله?هاي كلبسيلا پنومونيه جدا شده از بيماران بستري در بيمارستان هاي طالقاني و مفيد شهر تهران مي?باشد. روش بررسي: اين مطالعه از نوع توصيفي- مقطعي مي?باشد كه از اسفندماه سال 1391 تا اسفندماه سال 1392 بر روي 100 ايزوله كلبسيلا پنومونيه انجام گرفت. تست?هاي حساسيت آنتي?بيوتيكي با روش ديسك ديفيوژن و براث ميكرودايلوشن بر اساس دستورالعمل CLSI انجام شد. متالوبتالاكتامازها و بتالاكتامازهاي با طيف وسيع با استفاده از روش ديسك تركيبي شناسايي شدند. ژن?هاي blaAIM, blaSPM, blaDIM, blaIMP, blaVIM ، blaTEM، blaSHVو blaCTX-M با روش PCRو Sequencing مورد بررسي قرار گرفتند و پورين?هاي غشاي خارجي OmpK35 و OmpK36 با تكنيك?هاي –PAGE SDS، PCRو Sequencing تشخيص داده شدند. يافته ها: از 100 سويه كلبسيلا پنومونيه جدا شده از بيماران بستري در بيمارستان طالقاني و كودكان مفيد، 48 مورد (48 درصد) بتا لاكتاماز وسيع الطيف و 3 (3 درصد) متالوبتالاكتاماز توليد مي?كردند. ژن?هاي blaTEM، blaSHV وblaCTX-M به?ترتيب در 24(50 درصد)، 30 (5/62 درصد) و 28 (33/58 درصد) از ايزوله?هاي كلبسيلا پنومونيه توليدكننده بتا لاكتاماز وسيع الطيف شناسايي شد ولي بقيه ژن?ها در ايزوله?ها ديده نشد. با استفاده از تكنيك SDS-PAGE، OmpK35در30 (5/62 درصد) ايزوله و OmpK36 در35 (91/72 درصد) ايزوله از 48 سويه توليدكننده بتا لاكتاماز وسيع الطيف شناسايي شد. در اين مطالعه، ايزوله?هاي كلبسيلا پنومونيه به فسفومايسين وتايجي سيكلين حساسيت بيشتري را داشتند. نتيجه گيري: در اين مطالعه، شيوع بتالاكتاماز با طيف وسيع در سويه?هاي كلبسيلا پنومونيه نگران كننده است و نياز به اقدامات كنترل عفونت از جمله مديريت مصرف آنتي?بيوتيك?ها و شناسايي سريع ايزوله?هاي مقاوم دارد. واژگان كليدي: بتالاكتاماز وسيع الطيف، پورين?ها، كلبسيلا پنومونيه، متالوبتالاكتاماز

Background and Objective: Klebsiella pneumoniae is one of the most important causative agents both in form of hospital acquired and community-acquired infections. This bacterium is one of the most prevalent pathogens that is isolated from hospitals and is associated with high mortality rates. The uprising trend of multi drug resistance among Klebsiella pneumoniae has limited the treatment options. The objective of this study was to detect Metallo-beta-Lactamases, Extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) and outer membrane porins among Klebsiella pneumoniae strains isolated from hospitalized patients in Taleghani and Mofid hospitals. Materials and Methods: This cross-sectional study was performed on 100 Klebsiella pneumoniae isolates from 2012 to 2013. Antibiotic susceptibility tests were performed via Kirby-Bauer disc diffusion and Broth Microdilution methods according to CLSI guidelines. Metallo-beta-Lactamases, Extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) producing strains were detected by phenotypic confirmatory test and Combination Disk Diffusion Test (CDDT), respectively. The blaAIM, blaSPM, blaDIM, blaIMP, blaVIM ، blaTEM، blaSHV and blaCTX-M genes were detected using PCR and sequencing method. The outer membrane porins including OmpK35 and OmpK36 were analysed throughSDS-PAGE, PCR and sequencing methods. Results: Out of 100 K. pneumoniae isolates, 48 (48%) and 3(3%) were ESBL and MBL positive, respectively. The presence of blaTEM-1, blaSHV and blaCTX-M-15 was detected in 24 (50%), 30(62.5%) and 28 (58.33%) isolates respectively, while other genes were not detected. Outer Membrane Porins, OmpK35, was detected among 30 (62.5%) of 48 ESBL-producing isolates while OmpK36 was found in 35(72.91%) of 48 ESBL-producing isolates. In this study, Fosfomycin and Tigecycline were more effective than other antibiotics. Conclusion: The high prevalence of ESBL-producing K. pneumoniae detected in this study is of great concern which requires infection control measures including antibacterial management and rapid detection of beta-lactamases-producing isolates. Keywords: Extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs), Porins, Klebsiella pneumoniae, Metallo-beta-Lactamases