جهش هاي ژن آلفا گلوبين در تعدادي از بيماران كرد ايراني مبتلا به تالاسمي آلفا

Alpha globine gene mutations in a case series of Kurdish Iranian alpha thalassemia patients

چكيده زمينه و هدف: آلفاتالاسمي يك بيماري ژنتيكي با وراثت اتوزومي مغلوب، همراه با كاهش يا عدم ساخت زنجيره هاي پلي پپتيدي آلفا گلوبين است. فرم شديد بيماري آلفا تالاسمي، بيماري H disease مي باشد كه حاصل غير فعال شدن 3 ژن آلفا در بيمار است. اين مطالعه به منظور شناسايي ژنوتيپ مبتلا يان به H بر روي تعدادي از بيماران وابسته به خون مراجعه كننده به مراكز درماني استان هاي كردستان و كرمانشاه انجام شد. روش بررسي: در يك مطالعه ي توصيفي 110 بيمار مبتلا به آنمي ميكروستيك و هيپوكروميك مورد بررسي قرار گرفتند. بر اساس نتايج شمارش سلول هاي قرمز خون و الكتروفورز هموگلوبين فرد بيمار قبل از تزريق خون و يا والدين فرد بيمار، افراد با تشخيص آلفا تالاسمي انتخاب و مورد بررسي مولكولي قرار گرفتند DNA به روشsalting out استخراج گرديد. جهش هاي حذفي شايع با روش multiplex PCR و جهش هاي نقطه اي با تعيين توالي مستقيم به روش sanger بررسي گرديد. يافته ها: در 12 بيمار با تشخيص تالاسمي آلفا 5 مورد حذف دو ژني Med (8/20 درصد)، 4 مورد حذف تك ژني ?3.7 (6/6 درصد)، 3 مورد حذف دو ژني20.5 (5/12درصد)، 3 مورد جهش نقطه اي polyA1 (5/12 درصد)، 2 مورد جهش نقطه اي Cd59 (3/8 درصد) و 2 مورد جهش نقطه اي IVSI(-5nt) (3/8 درصد) بدست آمد. 4 نفر از بيماران واجد بيماري H از نوع حذفي (?-/--)، 3 مورد بيماري H از نوع غيرحذفي (??T/--) و 2 مورد هم واجد دو جهش نقطه اي (??T/??T) بودند. 2 نفر از بيماران وابسته به تزريق خون بودند و ژنوتيپ فردي كه به صورت منظم خون تزريق مي نمود، CD59??/MED--تشخيص داده شد. فردي كه به صورت نامنظم و بر حسب نياز چند بار تزريق خون انجام داده بود داراي ژنوتيپ ?3.7-/?20.5-- بود. در 7 مورد از بيماران بزرگي طحال مشاهده شد و در 3 نفر ديگر قبلا، عمل طحال برداري انجام شده بود. نتيجه گيري: نتايج بدست آمده نشان از تنوع جهش هاي آلفا گلوبين در گروه مورد مطالعه و اهميت جهش هاي نقطه اي در بيماري H داشت. هرچند تعيين رابطه فنوتيپ و ژنوتيپ دقيق تر و تشخيص موارد بيماري H كه نياز به تشخيص قبل از تولد دارند ضرورت انجام مطالعه اي وسيع تر در سطح ملي را مي طلبد. واژه هاي كليدي: آلفا تالاسمي، بيماري H، كردستان، كرمانشاه.

ABSTRACT Background and Aim: Alpha Thalassemia is an autosomal recessive genetic disease by reduced or absent synthesis of alpha globin polypeptide chains. One of the severe forms of disease with 3 alpha globin genes inactivation is H disease. In this study genotype of H disease was assessed in some patients with blood abnormalities referred to hospitals of Kermanshah and Kurdistan provinces. Materials and method: In this descriptive research, 110 patients with microcytic and hypochromic anemia were recruited. Based on CBC and hemoglobin electro phoresis tests in patients before blood transfusion or their parents, alpha thalassemia was diagnosed. DNA was extracted by salting out method. The common deletions, alpha globin point mutations and direct sequencing were investigated using multiplex PCR and Sanger methods respectively. Results: In twelve alpha thalassemia patients, it has been shown the deletion mutations of --Med in 5 patients (20.8%), -?3.7 in 4 patients (6.6%) and -?20.5 in 3 patients (12.5%) and also point mutations polyA1 in 3 patients (12.5%),-?cd59 in 2 patients (8.3%) and -?IVSI (-5nt) in 2 patients (8.3%). In 4 cases deletion (-?/--) and in 3 cases (40%) non-deletion H disease (--/??T) were diagnosed. Two cases showed point mutation of ??T/??T. Two patients were blood-transfusion dependent. The first one who received regu lar blood monthly, showed --Med/?cd59 genotype. The second one with -?20.5/-?3.7 genotype received blood occasionally. In 7 patient’s enlargement of spleen was observed and in 3 patients splenectomy was performed earlier. Conclusion: The results showed the genetic diversity in alpha-globin and the importance of point mutations in the H disease. However, further study should be done to determine the accurate genotype and phenotype relationship and to diagnose of H disease in prenatal cases. Keywords: Alpha Thalassemia, H disease, Kurdistan, Kermanshah.