باززايي گياه ازمك (Cardaria draba L.) از طريق كشت بافت

Regeneration of White top (Cardaria draba L.) using Tissue Culture

كشت بافت روشي مفيد و كاربردي در جهت ريزازديادي و توليد انبوه گياهان در يك دوره كوتاه بدون در نظر گرفتن فصل كاشت و رويش مي باشد علاوه بر اين كشت بافت روشي جديد و موثر براي اصلاح گياهان از طريق انتقال ژن است. با اين حال عدم وجود يك سيستم كشت بافت و باززايي موثر براي بسياري از گياهان احساس مي شود. ازمك با نام علمي Cardaria draba از جمله اين گياهان است، اين گياه با داشتن تركيب شيميايي سولفورافان جزو گياهان دارويي محسوب مي شود كه ضرورت دستيابي به دستورالعمل مناسب كشت بافت و باززايي موثر براي اين گياه به شدت احساس مي شود. در اين پژوهش توانايي گياه براي كال زايي و شاخه زايي مستقيم در محيط كشت بافت به صورت دو آزمايش فاكتوريل جداگانه در قالب طرح بلوك هاي كامل تصادفي با دو فاكتور BAP در7 سطح و NAA در 4 سطح كه در آزمايش اول بر روي نمونه هاي برگ لپه و در آزمايش دوم روي محور زير لپه در سه تكرار مورد مطالعه قرار گرفت. با توجه به آناليز آماري در سطح 5 درصد، تيمار با غلظت هورموني سه ميلي گرم در ليتر BAP به همراه نيم ميلي گرم در ليتر NAA و تيمار هورموني با سه ميلي گرم در ليتر BAP و يك ميلي گرم در ليتر NAA به ترتيب بهترين كال زايي در ريزنمونه هاي برگ لپه اي و مناسب ترين تعداد شاخه در ريزنمونه هاي محور زير لپه را نشان دادند. بهترين ريشه زايي براي ريزنمونه هاي محور زير لپه و برگ-هاي لپه اي به ترتيب در تيمارهاي با غلظت هورموني نيم ميلي گرم در ليتر BAP به همراه يك ميلي گرم در ليتر NAA و تيمار هورموني با غلظت يك ميلي گرم در ليتر NAA به تنهايي انجام گرفت. سپس گياهان به مدت 2 هفته در محيط كشت پايه MS بدون هورمون و 4 هفته در گلدان هاي حاوي پيت ماس استريل در شرايط گلخانه نگهداري شدند و 90 درصد موفقيت در باززايي گياهان مشاهده شد.

Tissue culture is a useful and applicable method in micropropagation and plants mass production in a short period of time irrespective of growing and planting season. Meanwhile it is a new and effective method to breed plants through gene transformation. Despite these advantages, a useful tissue culture system for effective regeneration is required for many plants such as White top (Cardaria draba). White top contains a lot of sulforaphan for which it is considered a medicine plant which in turn highly requires a suitable protocol for its effective regeneration. In this study, the samples gathered in Kerman Township were used and the ability of the plant for callus induction and shoot regeneration was studied in vitro in two separate factorial experiments in randomized complete block design, BAP: in 7 levels and NAA in 4 levels. The first experiments were carried on cotyledon explants and the second one on hypocotyl explants with 3 replications in the years 2010 and 2011. Considering the statistical analysis (p?0.05), 3 mg/L BAP plus 0.5 mg/L NAA treatment and 3 mg/L BAP plus 1 mg/L NAA hormone treatment had the callus induction and the most suitable number of shoots for cotyledon and hypocotyl explants, respectively. The best root generation was for cotyledon and hypocotyl explants using only 1 mg/L NAA treatment and 0.5 mg/L BAP plus 1 mg/L NAA treatment, respectively. All the samples were placed on MS liquid containing 2 mg/L IBA and then they were elongated in the full strength medium without growth regulators for 2 weeks. After that, they were kept in the pots containing sterilized peat moss under greenhouse conditions for 4 weeks which resulted in 90% success in the plants regeneration.