جداسازي و شناسايي فنوتيپي ويبريو آلجينوليتيكوس (Vibrio alginolyticus) به صورت همزيست از اسفنج هاي خليج فارس بوسيله كيت API 20NE

Isolation and Identification of symbiotic Vibrio alginolyticus from Persian Gulf sponges with API 20NE kit

ويبريو آلجينوليتيكوس (Vibrio alginolyticus) يكي از باكتري هاي گرم منفي بيماري زا و نمك دوست است كه به خانواده ويبريوناسه تعلق دارد. به طور طبيعي اين باكتري در محيط هاي دريايي معتدل و دهانه رودخانه يافت مي شود كه عفونت هاي انساني مختلف از جمله عفونت زخم و گوش را ايجاد مي كند. بنابراين، مطالعه پيش روبه منظور جداسازي و شناسايي ويبريو آلجينوليتيكوس همزيست از اسفنج هاي خليج فارس با استفاده از كيت هاي تشخيصي API 20NE انجام شد. براي اين منظور تعداد 4 گونه متفاوت اسفنج (جنس آلجيلاس و اسپونجيا) توسط غواص از عمق 1 تا 5 متري آب هاي اطراف اسكله شهيد حقاني بندرعباس جمع آوري شد (شهريور 1392). اسفنج ها همراه با آب دريا به آزمايشگاه انتقال داده شدند و بعد از شستشو بوسيله آب مقطر، عصاره گيري با استفاده از آب دريا صورت گرفت. سپس بر روي عصاره ها رقت سازي انجام شد و متعاقبا بر روي محيط هاي مارين آگار2216 و تي سي بي اس كشت سطحي انجام گرفت. پليت ها به مدت 48 ساعت در دماي 25 درجه سلسيوس قرار گرفتند و جدايه ها در ابتدا با استفاده از تست هاي رن آميزي گرم، اكسيداز و كاتالاز تعيين خصوصيت شدند. در نهايت جدايه ها از طريق كيت هاي API 20NEبه صورت بيوشيميايي شناسايي شدند. نتايج حاصله از اين مطالعه نشان داد در كل 22 جدايه گرم منفي بودند. از اين ميان، 4 جدايه به عنوان ويبريو آلجينوليتيكوس شناسايي شدند. چون اين باكتري براي انسان بيماري زا است بنابراين، نتايج پيشنهاد مي كند مردمي كه در اين منطقه جغرافيايي زندگي مي كنند بايد از خطرات اين باكتري آگاه باشند و در صورت داشتن هر گونه زخم يا خراش از شنا كردن در اين منطقه خودداري كنند.

Vibrio alginolyticus is a pathogenic and halophilic Gram negative bacterium belongs to family Vibrionaceae. The bacterium naturally found in temperatemarine and estuarine environments, which cause different type of human infections like wound infection and otitis. Hence, the present study was conducted to isolate symbiotic Vibrio alginolyticus from Persian Gulf sponges and then characterize the isolates using API 20NE diagnostic kit. For this purpose, 4 different sponge species (Algelas sp. and Spongia sp.) were collected from 1 to 5 meters depth of Bandar Abbas Shahid Haghani warf’s surrounding waters (August 2013) by scuba diving. The sponges with sea water have been transferred to the microbiological lab and after washing under distilled water, extracted using sea water. Then the extracts were serially diluted and subsequently cultured on Marine Agar2216 and TCBS media.The plates were kept at 25°C for 48 hrs and the isolates were preliminary characterized using: Gram staining, Oxidase, Catalase and Citrate tests. Finally, the isolates were biochemically identified through API 20NE kit (Biomerieux, France). The results obtained from this study indicated that totally 22 bacterial isolates were gram negative. Out of all, 4 isolates were identified as Vibrio alginolyticus. Because the bacterium is pathogenic for human therefore, the results proposed that the people who live in this geographical area should be aware for the health risks of this bacterium and in case of any wound or abrasion don’t swim in this part.