بررسي اثرات هم‌افزايي آنتي‌بيوتيك فسفومايسين و اسانس گياه Citrus aurantifolia بر روي ايزوله‌هاي مقاوم به متي‌سيلين استافيلوكوكوس اريوس

EVALUATION OF THE SYNERGISTIC EFFECT OF PHOSPHOMYCIN AND CITRUS AURANTIFOLIAʹʹS ESSENTIAL OIL ON METHICILIN RESISTANT STAPHYLOCOCCUS AUREUS ISOLATES

پيش‌زمينه و هدف: استافيلوكوكوس اوريوس كوكسي گرم مثبت و عامل ايجاد طيف وسيعي از عفونت‌ها است. مقاومت به متي‌سيلين در اين باكتري معمولاً با مقاومت به شمار متعددي از ساير آنتي‌بيوتيك‌ها همراه است و شيوع بالاي اين ايزوله‌ها مي‌تواند شكست‌هاي درماني را موجب گردد. فسفومايسين ازجمله آنتي‌بيوتيك‌هاي مهاركننده بيوسنتز پپتيدوگلي كان است كه در درمان عفونت‌هاي ناشي از باكتري‌هاي مقاوم به آنتي‌بيوتيك‌هاي متعدد كاربرد دارد. اثرات ضد ميكروبي اسانس Citrus aurantifolia بر روي استافيلوكوكوس هاي مقاوم به متي‌سيلين قبلاً نشان داده شده است. در اين مطالعه براي اولين بار اثرات كاربرد توام غلظت‌هاي تحت كشنده فسفومايسين و اسانس Citrus aurantifolia در تشديد اثرات ضد ميكروبي يكديگر در شرايط برون تني بر روي ايزوله‌هاي باليني مقاوم به متي‌سيلين استافيلوكوكوس اريوس موردبررسي قرار گرفته است. روش كار: 23 ايزوله باليني استافيلوكوكوس اوريوس مقاوم به متي‌سيلين با روش‌هاي استاندارد از نمونه‌هاي باليني جمع‌آوري و شناسايي شدند. مقادير حداقل غلظت مهاركننده رشد و حداقل غلظت كشنده فسفومايسين با رقت‌هاي متوالي از آنتي‌بيوتيك در محيط كشت مايع در دامنه غلظت حدفاصل 25/0 - 128 ميلي‌گرم در ليتر و مقادير حداقل غلظت كشنده اسانس Citrus aurantifolia در دامنه غلظت 10?- 078/.? حجمي از اسانس تعيين شد. به‌منظور بررسي اثرات سينرژيتيك غلظت‌هاي مختلفي از اسانس به محيط كشت مايع با روش رقيق‌سازي متوالي اضافه شد. سپس بالاترين غلظتي از فسفومايسين كه از حداقل غلظت كشنده فسفومايسين براي هر ايزوله كمتر بود، به كليه لوله‌ها اضافه شد و باكتري مورد آزمايش تلقيح شد. پس از طي زمان كافي حداقل غلظت كشنده آنتي‌بيوتيك در حضور اسانس با روش ذكرشده تعيين شد. يافته‌ها: از 23 ايزوله مقاوم به اگزاسيلين 13درصد نسبت به تمامي غلظت‌هاي موردمطالعه از فسفومايسين حساس و 7/8درصد مقاوم بودند. ميانگين حداقل غلظت بازدارنده در مورد ساير ايزوله‌هاي استافيلوكوكوس اريوس مقاوم به متي‌سيلين با محاسبه ميانگين Min±SD برابر با 9/52 ±56 ميكروگرم در ميلي‌ليتر و ميانگين حداقل غلظت كشنده 15/42±11/76 تعيين شد. ميانگين حداقل غلظت كشنده اسانس در مورد كليه ايزوله‌ها برابر با 4?±3?تعيين شد. در 77درصد ايزوله‌هاي تحت بررسي حالت سينرژيسم مشاهده شد و در 23درصد ايزوله‌ها تاثير سينرژيتيك اسانس و دارو به اثبات نرسيد. بحث و نتيجه‌گيري: با توجه به مقاومت بالاي ايزوله‌هاي تحت بررسي در مطالعه حاضر در مقايسه با مطالعات مشابه، لزوم بررسي دقيق حساسيت آنتي بيوتيكي، براي ارايه الگوي درماني مناسب ضروري به نظرمي رسد و نشان مي‌دهد كه فسفومايسين بايد با احتياط مورداستفاده قرار گيرد. هم‌چنين با توجه به اثرات سينرژيستيك اسانس و فسفومايسين كاربرد همزمان اين دو تركيب به‌عنوان مواد ضد ميكروبي پس از انجام مطالعات تكميلي پيشنهاد مي‌شود.

Background & Aims: Staphylococcus aureus is a gram-positivecoccal bacteriumthat that can cause a range of infections. Methicillin resistance in these bacteria is often in companion with resistance to multiple antibiotics. High prevalence of these isolates can cause treatment failure. Phosphomycin is a peptidoglycan biosynthesis inhibitor that is used in treating infections caused by multi-drug resistant bacteria. The antimicrobial effects of Citrus aurantifolia’s essential oil on methicillin resistant S.aureus have been shown previously. The aim of this study was to evaluate the synergistic effect of sub-MBC doses of Phosphomycin with Citrus aurantifoliaʹs essential oil against methicillin-resistant S.aureusisolates. Materials & Methods: In this study, 23 clinical isolates of methicillin-resistant S.aureus were collected from clinical samples and these isolates were identified based on biochemical methods. Susceptibility of isolates to different antibiotics was tested by disk diffusion method. In order to determine the minimum inhibitory and bactericidal concentrations of phosphomycin and Citrus aurantifoliaʹs essential oil, serial dilutions of antibiotic and essential oil were prepared in broth medium in concentrations ranging between 0.25-128mg/L and 0.078 10?- , respectively. The amounts of minimum bactericidal concentrations for a mixture of dilutions of essential oil with sub-MIC doses of Phosphomycin were also determined. Results: Among 23 methicillin resistant isolates, 13% were sensitive to all investigated concentrations of phosphomycin and 87 % were resistant. The average amounts of minimum inhibitory and minimum bactericidal concentrations for the other isolates were 56 ± 52.9 and 76.11±42.15 µ/ml, respectively. The average amounts of minimum bactericidal concentrations for the Citrus aurantifoliaʹs essential oil was 3%±4%. Synergism has been shown in 77% of investigated isolates but not about other 23% of isolates. Conclusion: Due to the higher resistance of isolates tested in this study in comparison with others, it seems that there is a need for exact evaluation of susceptibility tests and being cautiousin using of phosphomycin alone. Also regarding to the synergistic effect of phosphomycin and Citrus aurantifoliaʹs essential oil on some methicillin resistant isolates, using the combination of them is advised as an effective antimicrobial agent.