بررسي پلي‏مورفيسم در الل ADA*2 از ژن آدنوزين دآميناز با سقط‏هاي خودبخودي مكرر در زنان شمالغرب ايران

The ADA*2 Allele of the Adenosine Deaminase Gene and Recurrent Spontaneous Abortions in Northwest of Iran

زمينه و هدف: منظور از سقط مكرر خودبخودي، وقوع دو يا سه سقط متوالي خودبخودي، قبل از هفته بيستم بارداري است. آدنوزين دآميناز در متابوليسم پورين‏ها نقش داشته و داراي دو ايزوآنزيمADA1 و ADA2 است. پلي‏مورفيسم G A (الل ADA* ) موجب افزايش سطوح آدنوزين مي شود. آدنوزين به دليل افزايش جريان خون به رحم و جفت داراي نقش محافظتي در برابر سقط هاي مكرر خودبخودي است. با توجه به تاثير فعاليت آنزيمي كاهش يافته اين پلي مورفيسم بر روي سطوح آدنوزين، نقش پلي مورفيسم G A (الل ADA* ) ژن آدنوزين دآميناز بر روي سقط هاي مكرر خودبخودي جمعيت شمالغرب ايران در اين مطالعه بررسي شد. روش كار: يك جمعيت 100 نفري از زنان به دو گروه تقسيم بندي شدند. گروه اول 50 نفر داراي سابقه سقط (حداقل دو بار) و گروه دوم شامل 50 نفر با حداقل دو زايمان موفق و بدون سابقه سقط، مورد بررسي قرار گرفتند. استخراج DNA از لكوسيت‏ها و با روش استاندارد استخراج DNA انجام شد. براي بررسي پلي ‏مورفيسم G A، واكنش زنجيره ‏اي پلي‏مراز (PCR) انجام و حضور يا عدم حضور اين پلي ‏مورفيسم توسط روشRFLP -PCR بررسي شد. به منظور تجزيه و تحليل آماري از آزمون مربع كاي استفاده شده و ارزش (05/0p < ) به عنوان سطح معني ‏داري در نظر گرفته شد. يافته‏ها: فراواني هموزيگوت‏ها (AA) در گروه كنترل 2% مشاهده شد. اين در حالي است كه هيچ هموزيگوتي (AA) در گروه بيمار ديده نشد. فراواني هتروزيگوت ‏ها (AG) در گروه كنترل20% و در گروه بيمار 8% گزارش شد (05/0p < ). فراواني هموزيگوت‏ها (GG) در گروه كنترل 78% و گروه بيمار 92% گزارش شد (05/0p < ). نتيجه‏گيري: با توجه به نتايج حاصل، به نظر مي‏رسد پلي ‏مورفيسم G A (الل ADA* ) و ژنوتيپ (ADA*1/ADA*2) AG به واسطه كاهش فعاليت آدنوزين دآمينازي، داراي نقش محافظتي در برابر سقط‏هاي مكرر خودبخودي است.

Background & objectives: Recurrent spontaneous abortion (RSA) is defined by two or more consecutive miscarriages before 20 weeks of gestation. Adenosine deaminase (ADA) is an enzyme of purine salvage pathway and has two important isoenzymes ADA1 and ADA2. The adenosine deaminase G22A polymorphism (ADA*2) increases the level of adenosine. Adenosine may play a protective role against recurrent spontaneous abortions, since it regulates blood flow into the uterus and placenta. In consideration of the effect of decreased enzymatic activity of adenosine deaminase G22A polymorphism on adenosine levels we evaluated the protective effect of ADA*2 allele against recurrent spontaneous abortions in north-west of Iran. Methods: A total of 100 women were recruited to form two groups. First one, with a history of recurrent spontaneous abortions (N=50), and the second one, without a history of abortions (N=50). Genomic DNA was extracted from peripheral blood with a commercial kit and PCR-RFLP analysis was used to identify the G22A genetic polymorphism. Fisherʹs exact test and odds ratio values were used to compare the proportions of adenosine deaminase genotypes and alleles between women with and without a history of recurrent spontaneous abortion (p < 0.05). Results: The frequency of homozygotes (AA) was 2% in control group, whereas no homozygote (AA) was found in the case group. The frequency of heterozygotes (AG) was 20% in control group and 8% in the case group (p < 0.05). The frequency of homozygotes (GG) was 78% in control group and 92% in the case group (p < 0. 05). A significant increase in the frequency of AG genotype in controls (p=0.014, OR=0.348) relative to women with the history of RSA demonstrates the protective effect of AG genotype in controls. Conclusion: The data suggest that women carrying the G22A polymorphism (ADA*2 allele) and AG genotype which is associated with the lower enzymatic activity are better protected against recurrent spontaneous abortions. Keywords: Recurrent Spontaneous Abortions, Northwest of Iran, Adenosine Deaminase