بررسي خصوصيات فنوتيپي و ژنوتيپي استافيلوكوكوس اورئوس جداسازي شده از شير گاوميش هاي مبتلا به اورام پستان تحت كلينيكي دراطراف شهرستان اروميه

Phenotypic and genotypic characteristics of Staphylococcus aureus isolated from buffalo subclinical mastitis in suburb of Urmia

ورم پستان تحت بالینی به عنوان یكی از بیماری‌های مهم در پرورش دام شیری مطرح می‌باشد. هدف از انجام این تحقیق ارزیابی خصوصیات فنوتیپی گونه استافیلوكوكوس اورئوس جدا شده از شیر گاومیش های مبتلا به ورم پستان تحت بالینی دراطراف شهرستان ارومیه بود. برای این منظور نمونه شیر 480 كارتیه متعلق به 120 راس گاومیش شیری بطور جداگانه جمع آوری و آزمایش غربالگری با استفاده از آزمایش ورم پستان كالیفرنیائی (CMT) برای تشخیص ورم پستان تحت كلینیكی انجام گردید. روش‌های باكتریولوژی به همراه آزمون‌های بیوشیمیائی جهت جداسازی استافیلوكوكوس اورئوس در مورد كلیه نمونه ها انجام گرفت. جهت تأئید تشخیص و تعیین تیپ مولكولی، استخراج DNA از تمامی جدایه‌های استافیلوكوكوس اورئوس انجام گردیده و آزمون PCR نیز به ترتیب توسط پرایمرهای اختصاصی ژن nuc و spa صورت گرفت. بر اساس نتایج حاصل از بررسی خصوصیات كشت و آزمایشات تفریقی بیوشیمیایی در 76 كارتیه تحت آزمایش (8/15 درصد) آلودگی ناشی از گونه‌های مختلف استافیلوكوكوس گزارش گردید. استافیلوكوكوس اورئوس كواگولاز مثبت 5 مورد (57/6 درصد)، از كل سویه‌های استافیلوكوكوس جدا‌سازی شده را به خود اختصاص داد. تمامی ایزوله‌های استافیلوكوكوس اورئوس (100درصد) بر اساس آزمایش مولكولی مبتنی بر تكثیر ژن nuc مورد تأئید قرار گرفت. تنها یك باند الگوی متمایز (bp 1150) در بررسی ژن spa از ایزوله‌های استافیلوكوكوس اورئوس گزارش گردید. بطور كلی نتایج بدست آمده نشان می‌دهد به دلیل بالا بودن میزان آلودگی ناشی از گونه های استافیلوكوكوس در نمونه شیر گاومیش‌سهای اطراف شهرستان ارومیه شناسائی و كنترل استافیلوكوكوس اورئوس در فصول مختلف سال اهمیت به سزائی دارد.

Subclinical mastitis is one of the most costly diseases of dairy animals. The aim of this study was to evaluation of the phenotypic and genotype characteristics of Staphylococcus aurous strains isolated from buffalo milk with subclinical mastitis around the city of Urmia. A total of 480 quarter milk samples were collected from 120 dairy buffaloes and screened for subclinical mastitis by the aid of California Mastitis Test (CMT). In order to isolate S. aurous by cultural methods, bacteriological examinations with biochemical tests were done on all samples. For the diagnosis and determining the molecular types, extraction of DNA from all S. aurous isolates was performed by PCR as well as by the nuc and spa gene-specific primers were done. According to results of culture characteristics and biochemical tests in 76 quarter under test (15/8%) infections were reported from various species of Staphylococci. Coagulase-positive Staphylococcus aurous in 5 cases (6/57%), accounted for the isolation of staphylococci. All isolates of Staphylococcus aurous (100%) based on molecular tests based on Nuc gene replication was confirmed. Only a distinct pattern of bands (bp1150) in Spa gene of S. aurous isolates were reported. Overall, the results show the high levels of pollution caused by Staphylococcus species in milk samples of buffalo around the city of Uremia, identification and control of seasonal variation in Staphylococcus aurous is very important.