حذف زيستي كروم توسط گونه سودوموناس جداسازي شده از خاك‌هاي آلوده به نفت خوزستان

Biosorption of chromium by Pseudomonas sp. isolated from oil contaminated soils of Khuzestan

 مقدمه: در دهه اخير روش‌های زيستی و ميكروارگانيسم‌ها برای پاكسازی آلاينده‌های محيطی نظير فلزات سنگين مورد توجه قرارگرفته‌اند. جداسازی سويه‌های مقاوم به فلز برای رسيدن به اين هدف اهميت زيادی دارد. در اين پژوهش جداسازی سويه‌های مقاوم به كروم مطالعه و بررسی شد. ‏‏‏ مواد و روش‏‏ها: براي انجام اين پژوهش، 5 نمونه خاك‌های نفتی مناطق خوزستان تحت شرايط سترون جمع‌آوری و پس از انتقال به آزمايشگاه، نمونه‌های همگن شده‏ خاك تا 10-10 در سرم فيزيولوژی سترون رقيق، و بر روی محيط‌های لوريابرتانی‌آگار حاوی 5 قسمت در ميليون دی كرومات پتاسيم كشت داده شد. پس از 24 ساعت گرمخانه‌گذاری، پرگنه‌های سويه‌های مقاوم جدا و روی محيط مكانكی‌آگار كشت شد تا سويه‌های مناسب جدا شود. باكتری‌های جداشده با آزمون‌های بيوشيميايی و رنگ‌آميزی گرم شناسايی شد. حداقل غلظت مهاركنندگی رشد در محيط كشت لوريابرتانی‌آگار برای غربال‏گری و جداسازی سويه‌هاي مقاوم انجام شد. بعد از انجام آزمون تعيين حساسيت آنتی‌بيوتيكی سويه‌ها، شرايط رشد بهينه باكتری در حضور كروم در دما، سرعت تكان و اسيديته با روش اسپكتروفتومتری در 600 نانومتر در كشت 24 ساعته بررسی شد. آزمون حذف كروم در شرايط بهينه برای سويه‏ برتر انجام شد. ‏‏‏ نتايج: در مجموع 24 سويه‏ سودوموناس جدا شد كه 14 سويه مقاوم به كروم بودند. سويه‏ برتر (2-Mac) در اين مطالعه توانست، در اسيديته برابر با 8، دمای 40 درجه سلسيوس و سرعت تكان 200 دور بر دقيقه، 6/35 درصد از كروم را از محيط حاوی 100 قسمت در ميليون فلز حذف كند. ‏‏‏ بحث و نتيجه‏گيری: از آنجا كه فلزات سنگين در بيشتر نقاط دنيا در اشكال مختلف فيزيكی- شيميايی به عنوان آلوده كننده‏ محيط زيست تلقی می‌شوند بايد از محيط حذف شوند. سويه جدا شده می‌تواند برای مطالعات زيست پالايی مكان‌های آلوده به كروم استفاده شود. ‏‏‏ 

 Introduction: In the last decade, biology and microorganisms is built to clean up environmental pollutants such as heavy metals. Isolation of metal resistant strains to achieve the goal is very important and the aim of this study was isolate the chrome resistant strains. Materials and methods: Five samples of oil contaminated soils of Khuzestan zones were collected under sterile conditions and transferred to laboratory immediately. The soil samples were homogenized and diluted by sterile saline up to 10-10 and cultured on Luria Bertani agar containing 5ppm potassium dichromate. Resistant strains were isolated after 24 hours of incubation, and then for isolation of appropriate strains, cultured on Macconkey agar. Isolated bacteria were identified by biochemical tests. Then, Luria Bertani agar was used for screening of resistant strains in form of MIC test. The best conditions for bacterial growth were found in the presence of chromium in various temperatures, rate of shaking and pH values by spectrophotometry at 600 nm in the overnight of cultivation. Absorption tests of metal were started under optimal conditions. Results: From total of 24 strains of isolated Pseudomonads, 14 strains were resistant to chromium. The best strain (Mac-2) had removed 35.60 % of chromium from aqueous culture mediums under optimal conditions (pH: 8, Temp: 40 C and Shaking rate: 200rpm). Discussion and conclusion: Since heavy metals in various physicochemical forms are considered as environmental pollutants in most parts of the world, thus, the contaminated regions must be detoxified. The isolated strain can be used for studies of bioremediation of chromium contaminated sites.