بررسي مقايسه اي محيط كشت بروسلا آگار ديفكو(BD) با محيط گليسرول دكستروز آگار جهت توليد واكسن 1 Rev

Comparative evaluation of Difco brucella agar (BD) and glycerol dextrose agar culture media for production of brucellosis Rev 1 vaccine

كنترل و ریشه كنی بیماری بروسلوز در ایران مبتنی بر واكسیناسیون دام های حساس با  واكسن 1 Rev است. این واكسن با استفاده از محیط های كشت بروسلا آگار تجاری تولید می شود كه به دلیل تحریم های اقتصادی، واردات این محیط كشت به سختی و با قیمت های بسیار گزاف امكان پذیر می باشد، لذا با توجه به سابقه تولید محیط گلیسرول دكستروزآگار در كشور و ثبت بین المللی آن، این مطالعه جهت بررسی امكان جاگزینی آن با محیط وارداتی انجام شد. بنابراین با هر كدام از محیط های فوق، 10 سری واكسن آزمایشی 1 Rev با بذر مادر (Master seed) یكسان تهیه شد. تعداد جرم باكتری در یك میلی لیتر از بالك هر سری ساخت به وسیله تهیه رقتهای سریالی و با شمارش تعداد پرگنه در واحد حجم (CFU)، محاسبه شد. همچنین سایر آزمایش های كیفی از جمله مروفولوژی پرگنه و تعیین درصد اجرام Rough، آزمایش بی ضرری (Safety) و آزمایش ایمنی زایی (Efficacy) در هر سری انجام گردید. نتایج نشان می دهد كه میانگین جرم باكتری در 10 سری ساخت 9 10×37/134 و 109×55/118  (CFU) و در صد پرگنه های Rough، 75/0 درصد و 281/1 درصد به ترتیب با بروسلا آگار دیفكو و محیط كشت گلیسرول دكستروز آگار سرم دار بود. از نظر آزمایش های بی ضرری و ایمنی زایی هیچ تفاوتی بین واكسن های تولیدی توسط دو نوع محیط كشت مشاهده نشد. بنابراین با توجه به همخوانی نتایج آزمایشات با استانداردهای تعریف شده، می توان از محیط كشت گلیسرول دكستروز آگار جهت تولید واكسن  1 Rev استفاده نمود. 

Control and eradication of the brucellosis is loosed on vaccination of susceptible animals by Rev 1 vaccine. Production of this Vaccine is done by brucella agar culture media that is imported. Recently, the price of the medium has increased because of economic sanctions. Therefore, regarding the production of glycerol dextrose agar in Iran and its record in international sources, this study was done for possible replacement with this medium. So, 10 batches of vaccine were produced using this medium and they were compared with the vaccines produced by brucella agar with the same master seed. The number of live bacteria in 1 ml of bulk product was counted by counting the number of colony forming unit (CFU). In addition, other quality tests like morphology of colony or determination of the percentage of rough organisms, safety and efficacy test were done on each batch. The results indicated the mean numbers of live bacteria in 1 ml of bulk products was134.37×109 and 118.55×109 (CFU) and the percentage of rough colonies was %0.75 and %1/281 for Vaccines produced by brucella agar and glycerol dextrose agar respectively. There was not any difference in other quality tests includes safety and efficacy and all quality parameters remained within the standard ranges. Thus regarding the suitable results, this new culture medium can be used for Rev1 vaccine production.