اثر هسپرتين بر القاي آپوپتوز و نكروز در لاين سلولي لنفوبلاستيك Jurkat Cells

The effect of hespertin in the induction of apoptosis and necrosis in lymphoblastic cell line Jurkat

چكيده سابقه و هدف لوسمي لنفوبلاستيك حاد(ALL)، يك اختلال نيوپلاستيك و يك بدخيمي شايع در كودكان است. آپوپتوز، مرگ برنامه‌ريزي شده و فيزيولوژيك سلولي بوده كه جهت هموستاز بافت‌ها ضروري مي‌باشد. در برخي از سرطان‌ها، ناكارآمدي در اين پروسه باعث پيشرفت سرطان مي‌گردد. اين پروسه مي‌تواند توسط عوامل مختلف درماني از جمله شيمي درماني القا شود. هسپرتين يك فلاونوييد در آب ميوه‌هايي هم چون پرتقال و ميوه‌هاي درون سرخ بوده و بر اساس تحقيقات آپوپتوز را در سلول‌هاي پانكراس انسان تحريك مي‌كند. هم چنين به عنوان فعال‌كننده NOTCH-1 و سركوبگر تومور كارسينوييد مي‌باشد. مواد و روش‌ها اين مطالعه از نوع بنيادي ـ كاربردي بود. لاين سلولي مورد استفاده در اين مطالعه، C121 (Jurkat cell)، در محيط مكمل RPMI1640 با10% سرم جنيني گاو(FBS) و پني‌سيلين/ استرپتومايسين كشت داده شد. ميزان رشد و بقاي سلولي با غلظت‌هاي مختلف هسپرتين توسط كيت MTS بررسي گرديد. ميزان مرگ سلولي توسط رنگ‌آميزي تريپان‌بلو و هم چنين توسط كيت آپوپتوزيس و با دستگاه فلوسايتومتري(Partec) مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها رده سلول‌هاي لنفوبلاستيك(C121) در مواجهه با غلظت‌هاي مختلف هسپرتين (محلول شده در DMSO 1/0%) تحت تاثير قرار گرفته و غلظت µM 200 دارو در زمان 48 ساعت به عنوان غلظت مهاري ياIC50 گزارش شد. نوع مرگ القايي توسط اين دارو با استفاده از بررسي مورفولوژيك و نيز فلوسيتومتري به صورت آپوپتوز بوده است. نتيجه گيري با توجه به اين كه هسپرتين توانايي القاي آپوپتوز را دارد و هم چنين باعث كاهش فعاليت سلولي مي‌شود، به نظر مي‌رسد داروي مناسبي براي مهار رشد سلول‌هاي توموري باشد.

Abstract Background and Objectives Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is a neoplastic disorder and a common malignancy in children. Apoptosis is a normal physiological process which occurs during the maintenance of tissue hemostasis. The defect in this process leads to the development of cancer. It can be induced by a variety of treatments, such as cytotoxic chemotherapy. Hesperetin, a flavonoid isolated from the red fruits, has been examined with regard to the inhibition of proliferation and induction of apoptosis in pancreatic cells. Hesperetin also activates NOTCH-1 and tumor suppressor in carcinoid tumor. Materials and Methods In this fundamental-applied research, the cell lines of C121 (Jurkat cell) were cultured in RPMI supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS) and Penicilin/streptomycin. The growth and survival of cells with various concentrations of hesperetin was evaluated by MTS kit. The amount of cell death by trypan blue staining and flow cytometry as well as by apoptosis kit (Partec) was examined. Results Lymphoblastic cell lines (C121) in exposure to different concentrations of hesperetin were affected and ?M 200 drug concentration at 48 hours was reported as inhibitory concentration or IC50. The mode of cell death induced by hesperetin was found to be apoptosis, as judged by the morphologic alteration of the cells and by Anexin v conjugated with FITC and flow cytometric analysis. Conclusions Since hesperetin can induce apoptosis and reduce cell activity, it seems appropriate to be able to inhibit the growth of tumor cells.