مرکز منطقه ای اطلاع رساني علوم و فناوري - شناسايي مولكولي و ارزيابي فعاليت ضدباكتريايي باسيلوس تويوننسيس توليد كننده لانتي بيوتيك جدا شده از خاك

چكيده لاتين :

چكيده سابقه و هدف: لانتي بيوتيك ها آنتي بيوتيك هاي پپتيدي كوچكي هستند كه بسياري از باكتري هاي گرم مثبت عليه ديگر باكتري ها توليد مي نمايند. اين مطالعه با هدف جداسازي و شناسايي مولكولي باسيلوس هاي توليد كننده لانتي بيوتيك از خاك و همچنين ارزيابي شرايط بهينه توليد و فعاليت ضد باكتريايي لانتي بيوتيك توليدي انجام شد. مواد و روش ها: در اين مطالعه بنيادي نمونه ها از خاك مزارع لوبيا سبز در استان فارس جمع آوري گرديدند. سلول هاي رويشي با روش پاستوريزه كردن از بين برده شدند. كلني هاي گرم مثبت اسپوردار انتخاب شدند. شيرابه كشت مايع باكتري، به منظور بررسي قابليت توليد لانتي بيوتيك با روش انتشار از چاهك مورد آزمايش قرار گرفت. كلني هاي مناسب با قابليت توليد لانتي بيوتيك انتخاب و با روش هاي بيوشيميايي و مولكولي شناسايي گرديدند. همچنين توليد لانتي بيوتيك در دما و دامنه هاي مختلف pH مورد بررسي قرار گرفت. يافته ها: پس از تعيين توالي، سويه جداسازي شده به عنوان باسيلوس تويوننسيس تشخيص داده شد. بيشترين ميزان توليد لانتي بيوتيك پس از 24 ساعت گرماگذاري در دماي 30 درجه سيليسيوس و در 7 pH انجام گرفت. نتايج نشان داد كه حضور گلوكز و پپتون با غلظت يك درصد مي تواند توليد لانتي بيوتيك را بهبود بخشد. همچنين لانتي بيوتيك خالص سازي شده بر تعدادي از باكتري هاي گرم مثبت داراي اثر ممانعت كنندگي از رشد بود. نتيجه گيري: با توجه به توانايي مطلوب سويه جداسازي شده در توليد لانتي بيوتيك، انجام مطالعات گسترده تر به منظور شناسايي دقيق تر لانتي بيوتيك توليدي براي كاربردهاي دارويي پيشنهاد مي گردد. Background & Objectives: Lantibiotics are small peptide antibiotics that produced by a large number of gram positive bacteria to limit growth of other bacteria. This study was performed with the aim of isolation and molecular identification of lantibiotic producer Bacilli from soil, also to optimize the production conditions and antibacterial activity of the product. Materials & Methods: In this basic research, soil samples were collected from green bean fields located at Kazerun. The vegetative cells were killed by pasteurization method and the Gram positive spore former colonies were selected for further studies. These bacteria were grown in the broth media and their culture extracts were examined for lantibiotic production by well diffusion method. Appropriate colonies with high ability for lantibiotic production were selected and identified by biochemical and molecular methods. Also lantibiotic production at different temperatures and pH values was investigated. Results: The isolated strain was identified as Bacillus toyonensis based on DNA sequencing. Maximum lantibiotic production was determined after 24h incubation at 30°C and pH 7. These results showed that the addition of 1% glucose and pepton can improve lantibiotic production. The purified lantibiotic showed inhibitory effects on some gram positive bacteria. Conclusion: According to ability of this isolated strain in lantibiotic production, further studies is required for more accurate identification of produced lantibiotic in order to be employed in pharmaceutical applications.