بررسي اثر مهاركنندگي عصاره ارقام گندم روي فعاليت آنزيم آلفا-آميلاز گوارشي سوسك كلرادو

Inhibitory effect of wheat seed cultivars extract s on digestive alpha amylase activity of Colorado potato beetle

سوسك برگ خوار سيب زميني (Coleoptera:Chrysomelidae) Leptinotarsa decemlineata(Say)، آفت كليدي سيب زميني در سراسر جهان مي باشد. باتوجه به اثرات نامطلوب كاربرد آفت كش هاي شيميايي در كنترل اين آفت، نياز به روش هاي جايگزيني براي كنترل اين آفات اجتناب ناپذير است. بنابراين هدف ازمطالعه حاضر بررسي اثر عصاره پروتييني ارقام گندم روي آنزيم آلفاآميلاز سوسك كلرادو مي باشد. براي استخراج آنزيم از حشره و عصاره پروتييني ارقام گندم به ترتيب از آب مقطر و NaCl 1/0 مولار استفاده شد. نتايج نشان داد كه عصاره پروتييني استخراج شده از گندم توانايي بالايي براي مهار آنزيم آلفاآميلاز سوسك كلرادو دارد. سنجش فعاليت آميلاز در حضور 5 غلظت مختلف از عصاره گندم رقم افلاك و ام وي هفده، يك روند مهار وابسته به غلظت را نشان داد. ميزان فعاليت آنزيم آلفا-آميلاز با استفاده از غلظت هاي 17، 5/8، 25/4، 125/2 و 0625/1 ميكروگرم پروتيين عصاره گندم رقم ام وي هفده به به ترتيب 18/30، 74/45، 74/48، 32/58 و 72/60 درصد نسبت به فعاليت آنزيم در غياب مهاركننده (شاهد) بود. نتايج نشان داد كه رقم افلاك اثر كمتري در مهار فعاليت آنزيم نسبت به رقم ام وي هفده دارد. در بررسي اثر اسيديته بر قدرت مهاركنندگي عصاره پروتييني گندم نشان داد كه بيشترين مهاركنندگي آنزيم در حضور بالاترين غلظت مهاركننده در اسيديته 5 مشاهده شد. بررسي اثر عصاره روي فعاليت آنزيم در ژل نشان داد كه شدت باند شاهد در حضور غلظت-هاي مختلف از هر دو مهاركننده گندم تغييركرد و اين تغييررنگ باندها وابسته به غلظت عصاره استفاده شده بود.

Colorado potato beetle, Leptinotarsa decemlineata (Say) (Coleoptera: Chyrsomelidae) is a key pest of potato worldwide. Given the adverse effect of the pesticides applied against this pest, alternative method for the pest control is unavoidable. Thus, the aim of the current study was to study the effect of wheat cultivars proteinaceous extract against the beetle ?-amylase. The enzyme extraction from the beetle and proteinaceous extract from the wheat seeds were done using distilled water and 0.1 M NaCl, respectively. The results showed that proteinaceous extracts of wheat seeds have great ability to inhibit Colorado potato beetle ?-amylase. Enzyme assays in the presence of five concentrations of Aflak and MV-17 wheat seed cultivars showed a dose dependant manner of enzyme inhibition. Remaining activity of the enzyme when concentrations of 17, 8.5, 4.25, 2.125 and 1.06 µg protein of extract were used was 18, 30, 45.74, 48.74, 58.32, and 60.72%, respectively compared to control. The results showed that Aflak cultivar is less effective in the enzyme inhibition than MV-17 cultivar. Studying the effect of pHs on the inhibition showed that the greatest inhibition in the presence of the highest amount of inhibitor was observed at pH 5. Gel assays showed that bands intensity was decreased in the presence of different concentrations of both cultivars extracts and the changes of the bands intensities was dose dependant.