بيان آنتي بادي تك دودماني ضد HER2/neu انساني Trastuzumab در توتون تراريخته

سرطان پستان شايع ترين نوع سرطان در ميان زنان است و سالانه بيش از نيم ميليون زن به اين بيماري مبتلا مي شوند.Trastuzumab (با نام تجاري Herceptin®) يك آنتي بادي تك دودماني انساني شده مشتق از تكنولوژي DNA نوتركيب است كه در درمان سرطان پستان متاستاتيك مورد استفاده قرار مي گيرد. با اين حال، درمان باTrastuzumab هزينه بسيار زيادي داشته و يك دوره درمان يكساله براي بيمار نياز به صرف هزينه بيش از 200 ميليون تومان دارد. در اين تحقيق امكان توليد آنتي بادي Trastuzumab در گياه توتون با استفاده از تراريختي پايدار به واسطه Agrobacterium tumefaciens بررسي شد. ريزنمونه هاي برگ توتون رقم Gewone groene با آگروباكتريوم سويه LBA4404 حاوي وكتورهاي دوتايي pBIN19-NTopTras-LC و pBIN19-NTopTras-HC، دربردارنده به ترتيب ژن هاي رمز كننده زنجيره سبك (LC) و زنجيره سنگين (HC) آنتي بادي Trastuzumab، تلقيح شدند. تجزيه لكه گذاري سادرن درج يك الي سه نسخه از ژن هاي HC و LC در ژنوم گياهان تراريخته را تاييد كرد. بيان تراژن ها در سطح RNA با تجزيه RT-PCR نيمه كمي مورد تاييد قرار گرفت. تجمع پروتئين در گياهان با تجزيه لكه گذاري وسترن مشخص شد و محتوي آنتي بادي در گياهان تراريخته 1/ 0 درصد پروتئين محلول كل برآورد شد. تجزيه ايمونوبلات عصاره خام گياهان نشان داد كهTrastuzumab در گياهان به شكل تترامر (H2L2) تجمع مي يابد. تجزيه نتاج T1 وراثت پايدار و تفكيك همزمان تراژن ها به صورت يك مكان ژني منفرد مندلي را تاييد كرد. نتايج اين تحقيق نشان داد كه گياهان مي توانند به عنوان يك سامانه جايگزين براي توليد مقرون به صرفه پروتئين هاي دارويي با ارزش بالا مورد استفاده قرار گيرند. اين مطالعه، براي اولين بار در كشور، گام نخست اساسي به سمت توسعهTrastuzumab گياهي را پيشنهاد مي كند.