شناسايي مولكولي تيلريا اويس (Theileria ovis) و تيلريا لستوكاردي (T. lestoquardi) در كنه هاي ناقل از خانواده ايكسوديده در استان لرستان

Molecular identification of Theileria ovis and T. lestoquardi in vector ticks of Ixodidae family in Lorestan province

تيلريوزيس، بيماري انگلي ناشي از تك ياخته درون سلولي گونه هاي تيلريا است كه توسط كنه هاي ايكسوديده منتقل ميشود. شناسايي كنه هاي ناقل در هر منطقه براي ايجاد برنامه هاي منسجم پيش گيري عليه اين بيماري، ضروري است. بر اين اساس، از فروردين تا مرداد 1391 تعداد 219 كنه از سطح بدن 150 راس گوسفند با سابقه تب و كم خوني از نقاط مختلف استان لرستان جمع آوري شد، در ضمن از خون محيطي اين گوسفندان، گسترش هاي خوني نازك تهيه شد. از غدد بزاقي كنه ها شامل 152 ريپي سفالوس سانگويينوس، 13 كنه ريپي سفالوس بورسا و 54 كنه هيالوما آناتوليكوم آناتوليكوم DNA استخراج شد. سپس با استفاده از يك جفت پرايمر اختصاصي به منظور تكثير قطعه ژني به اندازه 520 جفت باز متعلق به ژن SSurRNA تيلريا اويس و يك جفت پرايمر اختصاصي تيلريا لستوكاردي براي تكثير ژن سطحي مروزوييت اين انگل با اندازه 785 جفت باز آزمايش PCR انجام شد. نتايج PCR نشان داد كه 37 نمونه (34/24 درصد) از كنه هاي ريپي سفالوس سانگويينوس، واجد ژنوم انگل تيلريا اويس بودند؛ اما هيچ يك از كنه هاي ريپي سفالوس بورسا به اين تك ياخته، آلودگي نداشتند. همچنين، از 54 كنه هيالوما آناتوليكوم آناتوليكوم 5 كنه (25/9 درصد) واجد ژنوم تيلريا لستوكاردي بودند. با آزمايش ميكروسكوپي گسترش هاي خوني، اشكال پيروپلاسمي گونه هاي تيلريا در 19 مورد (66/12 درصد) مشاهده شد. با توجه به گسترش وسيع ريپي سفالوس سانگويينوس نسبت به ساير كنه ها به نظر ميرسد كه اين كنه احتمالاً عمده ترين عامل انتقال تيلريا اويس در استان لرستان باشد.

Theileriosis is caused by an intracellular protozoan parasite of Theileria species, which is transmitted by Ixodidae ticks. Recognition of the vector ticks is essential in each area for establishing some integrated preventive measures against the disease. Therefore, 219 ticks were collected from the body surface of 150 sheep suffering from fever and anemia, in different parts of the province, during April - August 2012. Also, thin blood films were prepared from the peripheral blood of these animals. DNA of the tick salivary glands including 152 Rhipicephalus sanguineus, 13 R. bursa and 54 Hyalomma anatolicum anatolicum were extracted. Then PCR, using a pair of 520 bp specific primer of SSurRNA gene of Theileria ovis, as well as a pair of specific primer for amplification of 785bp of T. lestoquardi merozoite surface antigens, was performed. The PCR revealed that 37 out of 152 R. sanguineus (24.34 %) were positive for Theileria ovis, whereas none of R. bursa ticks were positive. Also, 5 out of 54 H. a anatolicum (9.25 %) were positive for T. lestoquardi. The microscopic examinations of blood smears showed that 19 out of 150 blood smears (12.66 %) contained the piroplasmic forms of Theileria species. Regarding the vast distribution of R. sanguineus in the area, it seems that this tick may be the main vector of Theileria ovis in Lorestan province, Iran.