شناسايي اولين جدايه‌هاي باسيل پاراتوبركلوزيس در بز و گوسفند از ناحيه مركزي ايران

Identification of the first isolates of Paratuberculosis bacillus in goat and sheep of central region of Iran

در این بررسی، بر روی نمونه‌های مدفوع دام‌های مشكوك به بیماری پاراتوبركلوزیز و نیز تعدادی از دام‌های سالم  منطقه سمیرم، بر اساس پروتكلهای مورد تایید OIE، عملیات كشت میكروبی در محیط هرولدز اگ با مایكوباكتین و نیز محیط هرولدز اگ بدون مایكوباكتین انجام گردید سپس كشتها در انكوباتور قرار داده شد و بطور هفتگی كنترل و ثبت اطلاعات انجام گردید. از كلنیهای رشد یافته، گسترش، رنگ آمیزی (ذیل–نلسون) و بررسی میكروسكوپیك بعمل آمد، سپس از نمونه‌های مثبت میكروسكوپی، كشت مجددساب كالچر شد و در نهایت آزمونهای مولكولار (PCR) بر روی نمونه‌های مثبت جهت تعیین شناسایی  و هویت  انجام شد. در طول انجام این بررسی تعداد 68 نمونه از بز و گوسفند منطقه سمیرم اخذ شد كه90% آنها دارای نشانی‌های بالینی مشكوك به بیماری یون بودند. در نهایت از 11 نمونه باسیل اسید فست یون جدا شد كه پس از كشت‌های مجدد و رسیدن به حجم مناسب باكتری، آزمون ملكولار زیر انجام گرفت. با استفاده از پرایمرهای IS900، مشخص شد كه  تمامی  باسیل‌های رشد كرده متعلق به جنس  مایكوباكتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبركولوزیس می‌باشند كه پس از الكتروفورز محصول PCR بر روی ژل و مشاهده باندی به اندازه bp 400 مورد تایید تشخیص نهائی قرار گرفت. 

Mycobacterium paratuberclosis is one of the most important of Micobacterium tuberculosis complex family. This pathogen can infect all ruminant animals like cattle, sheep and goat. This research was done in central of Iran on goats & sheep those have signs of Johneʹs disease .The samples were put in safe packing and cold position beside ice. We worked on samples according to the (O.I.E) protocols: Decontamination, Culture in special mediums & Incubation in  37. C for about 20 weeks  &  wrirte results. The special mediums in this research include: Herrold’s Eeg Yolk with Mycobactin & Herrold’s Eeg Yolk without  Mycobactin Finally,in culture stage we 11 positive samples from 68 total. In molecular stage, by IS9 0 and PCR technics,we found that all of these  positive samples from Mycobacterium avium subsp Paratuberculosis. This research was done with cooperation of Razi Research Institute and Isfahan Veterinary Organisation.