اثير نوع ريزنمونه برگي و غلظت هاي مختلف تنظيم كننده هاي رشدي بر كالوس‏ زايي و باززايي گياه آنتوريوم (Anthurium andreanum Var. Fire)

Effect of Leaf Explants Types and Various Levels of 2, 4-D on Callus Induction and Plant Regeneration in Anthurium andraeanum

در ريزازديادي درون شيشه اي آنتوريوم القاي كالوس از ريزنمونه يكي از مراحل مهم و حساس مي باشد. اين آزمايش بصورت فاكتوريل در قالب طرح كاملا تصادفي با 4 تكرار در دانشگاه علوم كشاورزي و منابع طبيعي ساري در سال 1388 انجام گرفت. رقم مورد استفاده در اين پژوهش فاير و ريزنمونه هاي مورد استفاده قطعات برگي داراي رگبرگ اصلي و فاقد رگبرگ اصلي بود. براي كالوس زايي محيط كشت موراشيك و اسكوك تغيير يافته (mMS) حاوي 3 درصد ساكارز، 7/0 درصد آگار، همراه با تنظيم كننده رشدي 2, 4-D در سطوح صفر، 04/ 0، 08/0، 12/0، 16/0، 2/0 و 24/0 ميلي گرم در ليتر و بنزيل آدنين (BA) به ميزان 0/1 ميلي گرم در ليتر مورد استفاده قرار گرفت. براي باززايي نيز از محيط كشت mMS محتوي 2 درصد ساكارز، 7/0 درصد آگار، 206 ميلي گرم NH4NO3، همراه با تنظيم كننده رشدي BA در سطوح 25/0، 5/0، 75/0 و 0/1 ميلي گرم در ليتر استفاده شد. 4 هفته پس از كشت، ريزنمونه هاي داراي رگبرگ اصلي شروع به كالوس زايي نمودند. بدون در نظر گرفتن غلظت 2, 4-D ريزنمونه هاي برگي داراي رگبرگ اصلي بيشترين درصد كالوس زايي (3/48 درصد) را داشتند. بيشترين درصد كالوس زايي (7/83 درصد) در ريزنمونه برگي داراي رگبرگ اصلي و در غلظت 16/0 ميلي گرم در ليتر 2,4-D و كمترين درصد كالوس زايي (5/12 درصد) در ريزنمونه برگي فاقد رگبرگ اصلي و در محيط كشت بدون 2,4-D مشاهده گرديد. بهترين سطح BA براي باززايي سطح 0/1 ميلي گرم در ليتر بود. بيشترين درصد باززايي (83/20 درصد) در غلظت 0/1 ميلي گرم در ليتر BA و كمترين درصد باززايي (3/8 درصد) در غلظت 25/0 ميلي گرم در ليتر BA مشاهده شد.

In micropropagation of Anthurium the most important and sensitive stage, is callus induction from explant. This experiment was conducted in a completely randomized design with factorial arrangement in 4 replications in Sari Agriculture Sciences and Natural Resources University (SANRU) in 2010. The cultivar used in this study is Fire and leaf segments with and without main nervure, were used as explants. Explants were cultured on mMS media with 2, 4-D (0.0, 0.04, 0.08, 0.12, 0.16, 0.20 and 0.24 mgL-1) and BA (1 mgL-1), 30% sucrose and 7% agar for callus induction. Calli were cultured in mMS media with BA (0.25, 0.5, 0.75 and 1 mgL-1), 206 mgL-1 NH4NO3, 20% sucrose and 7% agar for shoot regeneration. Four weeks after inoculation, callus induction initiated in explants with nervure. Regardless of 2, 4-D concentrations, leaf explants with the main nervure, showed highest callus induction (48.3%). The leaf explants with main nervure in mMS medium contain 0.16 mgL-1 2, 4-D showed the highest callus induction (83.7%) and the leaf explant without main nervure in mMS medium without 2, 4-D showed the lowest callus induction (12.5%). The best rate of BA for shoot regeneration (20.83%) was 1 mgL-1. The callus on mMS medium containing 1 mgL-1 BA showed the highest shoot regeneration (20.83 %) and the callus in mMS medium containing 0.25 mgL-1 BA showed the lowest shoot regeneration.