مقايسه كينتيك آنزيم تريپسين تخليص شده از ضمايم پيلوريك ماهي كيلكاي معمولي (Clupeonella cultriventris caspia) با استفاده از سوبستراي سنتتيك آميدي و استري

The kinetic comparison of purified trypsin enzyme from common kilka (Clupeonella cultriventris caspia) pyloric caeca using the amidolytic and esterolytic synthetic substrate

در اين پژوهش پارامترهاي كينتيك آنزيم تريپسين تخليص شده از ضمايم پيلوريك ماهي كيلكاي 1 و استري (BAPNA) با استفاده از سوبستراي آميدي (C.cultriventris caspia) معمولي 2(TAME) مورد بررسي قرار گرفت. نتايج حاصل از مقايسه كينتيك آنزيم تريپسين بين سوبستراي (kcat) ثابت كاتاليزوري ،(Vmax) نشان داد كه پارامترهاي كينتيكي فعاليت بيشينه TAME و BAPNA بالاتر بودند BAPNA نسبت به سوبستراي TAME در سوبستراي (kcat/Km) و كارايي كاتاليزوري بود. BAPNA كمتر از سوبستراي TAME 3 در سوبستراي (Km) ولي مقدار ثابت ميكاييليس- منتن .(P < 0/ بود ( 05 BAPNA بطور معنيداري بالاتر از نوع TAME آنزيم در سوبستراي Vmax مقدار بود ولي اختلاف معنيداري را نشان BAPNA كمتر از نوع TAME در سوبستراي Km مقدار ثابت بطور معنيداري بالاتر از نوع TAME در سوبستراي kcat/Km و kcat مقادير .(P > 0/ نداد ( 05 بنابراين ميتوان نتيجه گرفت كه ميل تركيبي آنزيم تريپسين تخليص شده .(P < 0/05) بود4 BAPNA از ضمايم پيلوريك ماهي كيلكاي معمولي نسبت به سوبستراي TAME بالاتر از BAPNA است و ميتوان از سوبستراي TAME براي سنجش فعاليت آنزيمي در اين گونه استفاده نمود.

n present study, the kinetic parameters of purified trypsin from pyloric caeca of common kilka (C.cultriventris caspia) were measured using the amidolytic (BAPNA) and esterolytic (TAME) substrates. The results of the kinetic comparison between BAPNA and TAME substrates showed that kinetic parameters including maximum velocity (Vmax), catalytic constant (kcat) and catalytic efficiency (kcat/Km) were in TAME higher than those from BAPNA while Michaelis-Menten constant (Km) showed the lower value in TAME than that from BAPNA. The Vmax value of TAME was significantly higher than that from BAPNA (P < 0.05). The Km value for TAME was shown to be lower than that from BAPNA without a significant difference (P > 0.05). The kcat and kcat /Km values of TAME were also significantly higher than those from BAPNA (P < 0.05). The findings reveals that purified trypsin from common Kilka pyloric caeca has a higher affinity for TAME than dose that from BAPNA and so TAME can be used as substrate for trypsin activity assessment.