ظهور پسودوموناس آئروژينوزا مقاوم به چنددارو: شناسايي ايزوله‏هاي داراي ژن blaCTX ايجادكننده عفونت‏ها در بيمارستان و تعيين حساسيت آنها به آنتي‏بيوتيك‏ها

Emergence of Multidrug-Resistant Pseudomonas aeruginosa: Detection of Isolates harboring blaCTX gene causing infections in hospital and determination of their susceptibility to antibiotics

مقدمه و اهداف: به دليل طبيعت منحصربفرد، توانايی زنده ماندن در محيط‏های مرطوب و مقاومت ذاتی به بسياری از آنتی‏بيوتيك‏ها و آنتی‏سپتيك‏ها، پسودوموناس آئروژينوزا پاتوژن شايع در بيمارستان‏ بويژه در بخش‏های مراقبت ويژه است. اهداف اين مطالعه شناسايی پسودوموناس آئروژينوزا دارای ژن blaCTX ايجادكننده عفونت‏ها در بيمارستان، تعيين حساسيت آنتی‏بيوتيكی آنها و بررسی توانايی توليد آنزيم‏های بتالاكتاماز وسيع‏الطيف (ESBL) بودند. روش كار: در اين مطالعه مقطعی نمونه‌های بالينی بيماران بستری در بخش‏های مختلف بيمارستان‏های شيراز جمع‏آوری شد. نمونه‏ها بر روی محيط‌های كشت ميكروب‏شناسی كشت داده شدند. باكتری‏های رشد كرده به كمك تست‏های بيوشيميايی و سيستم API 20NE اختصاصی باكتری‏های غيرتخميركننده مورد تاييد نهايی قرار گرفتند. بر اساس پروتكل CLSI 2014، به ترتيب از روش‏های استاندارد ديسك ديفيوژن، Combination Disk، تست اصلاح‏شده هاج [MHT] وE-test برای بررسی حساسيت آنتی‏بيوتيكی، شناسايی سويه‏های توليدكننده آنزيم‏های بتالاكتاماز وسيع‏الطيف، سويه‏های توليد كننده آنزيم كارباپنماز و تعيين MIC ايمی‏پنم استفاده ‏گرديد. از روش ملكولی PCR برای شناسايی سويه‏های دارای ژن blaCTX استفاده شد. نتايج: در اين مطالعه 45 ايزوله پسودوموناس آئروژينوزا از نمونه‏های مختلف بالينی ايزوله گشتند. نوزده بيمار (2/42 درصد) بيمار مرد و 26 (8/57 درصد) مورد آنها زن بودند. 8/57 درصد (26 مورد) سويه‏ها از نمونه خلط ايزوله شدند. موثرترين داروها بر روی ايزوله‏ها آميكاسين و كليستين بودند بطوريكه 8/97 درصد آنها به اين داروها حساسيت نشان دادند. ايزوله‏ها بالاترين مقاومت را به ترتيب به سفوتاكسيم (8/97%) نشان دادند. تنها 8/77 درصد سويه‏ها به كارباپنم‏های گروه 2 (يعنی ايمی‏پنم و مروپنم) پاسخ دادند. همه ايزوله‏های مقاوم به ايمی‏پنم دارای MIC >32 و بالاتر بودند. 17 سويه (7/37 درصد) به كينولون‏های مورد بررسی (سيپروفلوكساسين، نورفلوكساسين) مقاومت نشان دادند. نتايج انجام PCR به منظور جستجوی ژن blaCTX در ايزوله‏های پسودوموناس آئروژينوزا كه 5/15 درصد سويه‏ها دارای اين ژن هستند. نتيجه‏گيری كلی: نتايج اين مطالعه از نقطه نظر تجربی و استفاده بالينی از داروها حائز اهميت است. ما معتقديم كه به منظور حفظ كارپنم‏ها به عنوان راهكار نهايی جهت درمان، استفاده از كارباپنم‏ها برای درمان پسودوموناس آئروژينوزا بايد برای بيمارانی مدنظر قرار گيرند كه دارای عفونت پلی‏ميكروبی هستند بويژه وقتی كه باكتری‏های بيهوازی در محل عفونت حضور دارند يا برای ايزوله‏های پسودوموناس مقاوم به ديگر آنتی‏بيوتيك‏ها استفاده ‏شوند.

Introduction and Objectives: Because of its ubiquitous nature, ability to survive in moist environments, and innate resistance to many antibiotics and antiseptics, P. aeruginosa is a common pathogen in hospitals. The goals of this study were detection of Psudomonas aeruginosa harboring blaCTX gene causing infections in hospitals, determination of their susceptibility to antibiotics and survey the ESBL production. Materials and Methods: In the present cross-sectional study, clinical samples from hospitalized patients (Shiraz, Iran) were collected, and culture was done on microbiological media. For final identification, biochemical tests and API 20NE system were used. Disc diffusion, combination disk, modified hodge test (MHT) and E-test were used for antibiotic susceptibility testing, ESBL production, carbapenemas production, and MIC values for imipenem, respectively, according to CLSI 2014 recommendations. The blaCTX gene was detected in the isolates by PCR molecular method. Results: In the current study, 45 isolates of Pseudomonas aeroginosa were obtained from hospitalized patients, consisting of 19 males (42.2%) and 26 females (57.8%). As observed, 57.8% (26 strains) of isolates were recovered from sputum. The most effective antibiotics against isolates were amikacin and colistin, with 97.8% of isolates showing sensitivity to them. The highest resistance was to cefotaxime (97.8%). As revealed, 77.8% of isolates showed response to group 2 carbapenems (imipenem, meropenem). All imipenem resistant strains have MIC > 32 for imipenem. Seventeen strains (37.7%) were resistant to quinolones (ciprofloxacin, norfloxacin). The results of PCR on blaCTX gene indicated that 15.5% of the isolates possess the gene. Conclusion: This study is important from a practical point of view. We believe that the use of imipenem for the treatment of P. aeruginosa should be reserved for situations where the infection is polymicrobial, particularly when anaerobic bacteria are present, or for pseudomonal isolates resistant to other antibiotics