اثر عصاره پروتييني تريتيكاله روي فعاليت آلفا آميلاز گوارشي شب پره مينوز گوجه فرنگي Tuta absoluta Meyrick (Lep.: Gelechiidae)

شب پره مينوز گوجه فرنگي Tuta absoluta Meyrick (Lep.: Gelechiidae) آفتي است چند نسلي و بومي آمريكاي جنوبي كه تهديدي جهاني براي محصول گوجه فرنگي شده است. اين آفت ابتدا از اروميه گزارش شد ولي اكنون تقريبا تمامي مناطق گوجه كاري ايران را آلوده كرده است. براي كنترل اين آفت از آفت كش هاي مختلف از جمله آفت كش هاي فسفره و پايروتروييدي و به طور معمول در مقادير زياد استفاده مي شود كه اين باعث ايجاد مقاومت، آلودگي محصول به باقيمانده سموم و حتي آلودگي محيط زيست مي شود. بنابراين هدف از مطالعه حاضر بررسي اثر عصاره نيمه خالص پروتييني بذر تريتيكاله روي فعاليت آنزيم هاي آميلاز اين حشره مي باشد. براي اين منظور، عصاره بذر با استفاده از محلول نمكي NaCl استخراج شد و با استفاده از آمونيوم سولفات به صورت نيمه خالص درآمد. سنجش آنزيمي نشان داد كه روند مهاركنندگي آنزيم آلفا آميلاز حشره بسته به غلظت مورد استفاده بود، يعني با افزايش غلظت مهاركننده ميزان درصد بازدارندگي آنزيم افزايش پيدا كرد. براي مثال، در غلظت نيم ميكروگرم پروتيين عصاره بذر، ميزان مهار آنزيم 31 درصد بود، در حالي كه در هشت ميكروگرم پروتيين عصاره بذر ميزان مهار آنزيم به 66 درصد رسيد. در بررسي تاثير اسيديته مشاهده شد كه بالاترين ميزان مهاركنندگي عصاره پروتييني در اسيديته هشت مي باشد و فراسوي اين اسيديته ميزان مهاركنندگي كاهش پيدا كرد. سنجش مهار آنزيم در ژل نيز مشاهدات سنجش آنزيم به وسيله دستگاه اليزاريدر را تاييد كرد، يعني با افزايش غلظت مهاركننده از شدت باند آميلازي كاسته شد. اين نتايج نشان مي دهد كه پروتيين هاي موجود در عصاره بذر تريتيكاله داراي پتانسيلي هستند تا در كنترل حشرات بيشتر مورد توجه قرار گيرند.

The Tomato leaf miner is a polyvoltine pest native to South America and is a universal threat to tomato. This pest was first reported from Orumieh but nowadays it has been reported from all tomato fields of Iran. In order to control this pest, various pesticides including organophosphorous and pyrithroid insecticides are used continuously which caused the insect to develop resistance, contamination of products to pesticides residue and contamination of the environment. Thus, the aim of the current study was to study the effect of semi-purified proteinaceous extract of triticale seeds on ?-amylase activity of the insect. Seed proteinaceous extract was obtained by NaCl solution and it was semi-purified using ammonium sulfate. Enzyme assay indicated that the insect amylase inhibition is dependant to the extract dose which is used i.e. with increasing inhibitor dose the amount of enzyme inhibition increased. For example, when 0.5 µg seed extract protein was used only 31% enzyme inhibition was achieved and when 8.0 µg seed extract protein was used 66% enzyme inhibition was obtained. In monitoring pH it was found that the highest inhibition was obtained at pH 8.0 and beyond this pH the amount of enzyme inhibition reduced. Gel assay confirmed our enzyme assay results which were done by Elisa reader instrument i.e. with increasing inhibitor concentration amylase band intensity decreased.