ارزيابي بيومكانيكي داربست سه بعدي زيستي تهيه شده از تاندون شترمرغ به عنوان گرافت

Biomechanical evaluation of three-dimensional biological scaffold made from Ostrich tendons as graft

هدف اصلی در مهندسی بافت ایجاد ساختاری مشابه ساختار طبیعی موجود در بدن موجود زنده، جهت ترمیم آسیب‌های بافتی است. همواره مشكلاتی در انجام پیوند بافت وجود داشته است. از جمله كمبود منابع بافتی مناسب و پس‌زدن ایمونولوژیك بافت‌های پیوند زده شده است؛ در مهندسی بافت یكی از جدیدترین روش‌ها به منظور كاهش واكنش ایمنی بدن نسبت به بافت پیوند زده شده، روش سلول‌زدایی بافت است. تعداد 12 نمونه تاندون آشیل شترمرغ در دو گروه سلول زدایی شده (گرافت) و نشده (كنترل) از شتر مرغ نر 2 تا 3 ماهه تهیه گردید. عمل سلول‌زدایی با سدیم دودسیل سولفات انجام شد. پس از ثبوت و طی روند معمول تهیه مقاطع بافتی، به منظور ارزیابی ساختار بافتی از رنگ آمیزی‌های هماتوكسیلین-ائوزین، پیكروسیروس قرمز و جهت بررسی میزان سلول‌زدایی و بقایای هسته از رنگ آمیزی DAPI استفاده گردید و ارزیابی استحكام بافتی به وسیله آزمون بیومكانیكی انجام شد. نتایج حاصل  از آن توسط Student-Test و Mann-Whithney با نرم افزار SPSS، در دامنه (05/0 ≥ p) مورد ارزیابی قرار گرفتند. در ارزیابی میزان سلول‌زدایی، 99% گرافت فاقد هسته و بقایای DNA بود. گروه كنترل در مقایسه  بازنوگرافت پس از طی فرآیند سلول زدایی، از نظر كیفیت كلاژنی فاقد اختلاف معنی‌دار و از نظر  نظم رشته‌ای دارای اختلاف معنی‌داری بود. در آزمون بیومكانیكی میزان تنش تفاوت معنی‌داری مشاهده نشد ولی در كرنش بافتی گرافت كاهش معنی‌داری را نشان داد. با ارزیابی خصوصیات ساختار بافتی و بیومكانیكی داربست سه بعدی تهیه شده در مقایسه با تاندون شترمرغ، مشخص شد این زنوگرافت دارای شرایط مناسب برای پیوند می‌باشد.

The main goal of tissue engineering design and create a structure similar to the natural structure of a tissue in vivo for repair tissue damages. Tissue transplantation, there are always problems, including a shortage of suitable tissue and immunological rejection of grafted tissue is in tissue engineering is one of the newest methods to reduce the immune response to transplanted tissue, is tissue decellularization methods (Acellular). After fixation and routine tissue  process, to evaluate the structure of tissue H&E stained, collagen quality assessment xenograft Picrosirius red stained , review and tracking the decellularization, detected  nuclei trace and any DNA remaining 4ʹ, 6ʹdiamino-2-phenylindole-2HCl (DAPI) staining was used. Assess tissue strength by biomechanical test was performed. Biomechanical results by Student t-Test and Mann-Whithney (P≤0.05)was performed with SPSS software. Compared with ostrich tendonsand  matrix three-dimensional structure after the process of decellularization, the tissue density is somewhat reduced cohesion between collagen fibers were observed in some places a few miles away. Quality collagen stained by Picrosirius red that there is no difference between them. In assessing the amount of de-cells after staining DAPI 99% of the three-dimensional scaffold and remains free of nuclear DNA. Biomechanical testing of Stress, there was no difference in graft tissue but strain showed a significant decrease. Evaluation of properties of three-dimensional tissue structure made of scaffolding and comparison with ostrich tendons found this graft is the appropriate for graft.