بررسي جهش V617F ژن JAK2 در بيماران مشكوك به ترومبوزيس به روشTaq man Allele Specific Real Time PCR

Study of V617F mutation in JAK2 gene in patients of suspected thrombosis

سابقه و هدف: ترومبوز يا ترومبوزيس، به تشكيل لخته خون در داخل يك رگ خوني مي گويند. اين عارضه عموماً با تجمع پلاكت ‌هاي خون پديد مي ‌آيد. اين تمايل به لخته شدن ناشي از عوامل بيروني و فاكتورهاي ژنتيكي است كه حاصل تغيير در مكانيسم لخته شدن مي ‌باشد. اين مطالعه با هدف به كارگيري از روش Taq man Allele-Specific Real-Time براي تشخيص و غربالگري جهش V617F ژن JAK2 در بيماران مستعد به ترومبوزيس صورت گرفت. مواد و روش ‌ها: در اين مطالعه با مراجعه به آزمايشگاه پاتوبيولوژي شهرستان رشت واقع در استان گيلان از ميان مراجعين براي بررسي عوامل ترومبوزيس، 110 خون كامل از افراد مبتلا و 105 خون كامل از افراد عادي (بدون سابقه بيماري) تهيه شد و پس از استخراج DNA از تمامي نمونه ‌ها، اقدامات لازم براي بررسي حضور جهش V617F ژن JAK2 با روشTaq man Allele-Specific Real-Time PCR انجام گرفت و با استفاده از روش ‌هاي آماري، نتايج مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت. يافته ‌ها: پس از تاييد صحت تكنيك مورد نظر بر روي نمونه‌ هاي كنترل، نتايج غربالگري اين روش در جمعيت افراد مراجعه كننده براي بررسي عوامل ترومبوزيس از جمله فاكتورهاي 2 و 5 نشان از عدم حضور اين تغيير بوده است. همچنين با غربالگري روي نمونه‌ هاي جمعيت كنترل، هيچ جهش V617F در ژن JAK2 شناسايي نگرديد. نتيجه‌ گيري: يافته ‌ها نشان داد تكنيك بكار گرفته شده قابليت كافي جهت تشخيص جهشV617F ژن JAK2 را دارا است. همچنين عدم شناسايي جهشV617F ژن JAK2 در جمعيت مراجعين ترومبوزيس جهت بررسي فاكتورهاي2 و 5، نشان داد كه جهشV617F ژن JAK2 در جمعيت مورد مطالعه به عنوان يكي از عوامل ترومبوزيس مطرح نمي ‌باشد.

Aim and Background: Formation of the blood clot inside a blood vessel is known as thrombose or thrombosis. This complication usually appears through the blood platelets. The tendency to clot originates from external and genetic factors which in turn, is a result of changing in the clotting mechanism. With the aim of applying a method known as ʹʹTaq man Allele- Specific Real-Timeʹʹ for diagnosis and screening of V617F mutation in JAK2 gene, this study was carried out in those patients being susceptible to thrombosis. Materials and Methods: In this study, through referring to the Pathobiology Laboratory of RASHT city situated in Guilan province, 110 perfect bloods from the afflicted individuals and 105 perfect bloods from the ordinary individuals (lacking past record of the disease) were provided out of the referrers in order to study the thrombosis factors and, after DNA extraction from the whole samples, required measures to study presence of V617F mutation in JAK2 gene were taken by a method known as Taq man Allele-Specific Real-Time PCR, then, using statistical methods, the results were analyzed. Results: After confirming the accuracy of the desired technique applied on the control samples, the results of screening this method in the population of individual referring to study the factors of thrombosis, including factors of 2 and 5, presence of this change was suggested. Also, none of the V617F mutation in JAK2 was identified by screening on the samples of the control population. Conclusion: Our findings showed that the applied technique is sufficiently capable of diagnosing the V617F mutation in JAK2 gene. Also, lack of identification of V617F mutation in JAK2 gene in the population of those referring to the Pathobiology Laboratory for thrombosis in order to investigate factors of 2 and 5 showed that V617F mutation in JAK2 gene in the studied population is not propounded as one of the thrombosis factors.