ارزيابي اثر اسانس گياه بومادران زرد بر رشد پروماستيگوت و آماستيگوت ليشمانيا ماژور در شرايط برون تني

Evaluation of the Effect of Achillea biebersteinii afan Essential Oil on Leishmania major Promastigote and Amastigote Growth under In Vitro Conditions

سالك يا ليشمانيوز جلدي يكي از بيماري‌هاي اندميك در برخي از نقاط ايران است. استفاده از تركيبات آنتيموان پنج ظرفيتي به‌عنوان خط اول درمان، با محدوديت‌ها و عوارض جانبي متعددي گزارش شده است. از اين رو همواره تلاش براي يافتن روش‌هاي درماني جديد و مؤثر مورد نظر است. در پژوهش حاضر، تاثير گياه بومادران كه از گياهان بومي كشور است بر رشد پروماستيگوت و آماستيگوت ليشمانيا ماژور در شرايط برون تني بررسي شد. مواد و روش‏ها: اين مطالعه تجربي در سال 1391 در دانشگاه تربيت مدرس انجام شد. اسانس گياه بومادران زرد به روش تقطير با بخار تهيه و تجزيه و تحليل اسانس توسط دستگاه گاز كروماتوگراف متصل به طيف نگار جرمي انجام شد. سپس اثر غلظت‌هاي 10، 15، 25 و 50 درصد اسانس گياه بومادران درشرايط برون تني روي رشد پروماستيگوت و ماكروفاژ آلوده به آماستيگوت ليشمانيا ماژور بررسي شد. اثر بخشي اسانس گياه بر پروماستيگوت و آماستيگوت انگل با استفاده از روش شمارش مستقيم و نيز آزمون MTT سنجيده شد در همه آزمون‌ها چاهك حاوي محيط كشت و انگل بدون افزودن دارو به‌عنوان كنترل در نظر گرفته شد. و نتايج با استفاده از از آزمون ANOVA مورد تجزيه و تحليل آماري قرار گرفت. نتايج: نتايج حاصل از آزمون MTT نشان داد كه 24، 48 و 72 ساعت پس از كشت انگل، تعداد پروماستيگوت‌ها در گروه‌هاي كنترل با گروه‌هاي تيمار شده با غلظت‌هاي 10، 15، 25 و 50 درصد اسانس گياه بومادران داراي اختلاف معني‌دار (05/0P < ) بوده است. 66 درصد ماكروفاژهاي آلوده به آماستيگوت 72 ساعت پس از كشت انگل تيمار شده با غلظت 50 درصد اسانس گياه از بين رفتند. نتيجه‌گيري: اسانس گياه بومادران زرد در از بين بردن پروماستيگوت‌هاي ليشمانيا ماژور و ماكروفاژ آلوده به آماستيگوت انگل، اثر مطلوبي دارد؛ بنابراين انجام مطالعه در شرايط درون تني براي استفاده درماني از آن براي زخم‌هاي سالك توصيه مي‌شود.

Cutaneous leishmaniasis is an endemic disease in certain areas of Iran. The use of pentavalent antimony compounds as first line treatment has been reported, however they are associated with limitations and adverse events. Hence, an attempt to find a new, effective compound has been under consideration. This study examines the effect of Achillea biebersteinii afan as, a native plant in Iran, against Leishmania major promastigote and amastigote growth under in vitro conditions. Methods: This experimental study was performed at Tarbiat Modares University in 1392.We extracted the essential oil of the Achillea biebersteinii afan plant by steam distillation and analyzed it by gas chromatography mass spectrograph. Then, we evaluated the effect of different concentrations (10%, 15%, 25% and 50%) of the oil on the growth of the promastigotes stage of Leishmania and infected macrophages that contained amastigotes under in vitro conditions. Effectiveness of the oil on promastigotes and amastigotes was assessed by direct count and the MTT assay. In all tests, each of the wells that contained culture media and parasites without drug were considered the control group. Data analyses were conducted with ANOVA. Result: The MTT results indicated significant differences among the number of parasites in the control and case groups treated with 10%, 15%, 25%, and 50% of the oil within 24, 48 and 72 hours after culture. The concentration of 50% of the oil killed 66% of the macrophages that contained amastigotes after 72 hours. Conclusion: Achillea biebersteinii afan oil was effective in killing Leishmania major promastigotes and infected macrophages that contained amastigotes. We have proposed to study the extract in vivo for treatment of cutaneous leishmaniasis lesions