ارزيابي توان تمايز سلول‌هاي بنيادي مشتق از خون قاعدگي به سلول‌هاي قلبي در شرايط آزمايشگاهي

Evaluation of differentiation potential of menstrual blood-derived stem cells to cardiomyocytes in vitro

مقدمه و هدف: در دهه‌هاي اخير، سلول‌هاي بنيادي به‌عنوان يك روش درماني جديد براي بيماران مبتلا به اختلالات قلبي معرفي شده است. به‌تازگي شناسايي سلول‌هاي بنيادي مشتق از خون قاعدگي به‌عنوان يك منبع منحصربه‌فرد از سلول‌هاي بنيادي با برخي خصوصياتي مثل سهولت دسترسي، توانايي تكثير و خودتجديدي بالا، اميد فراواني را براي سلول‌درماني ايجاد كرده است. در اين مطالعه، توانايي تمايز اين سلول‌ها به كارديوميوسيت بررسي شده است. مواد و روش‌ها: بعد از بررسي ماركرهاي سطحي اين سلول‌ها تمايز آن‌ها به سلول‌هاي شبه كارديوميوسيت در حضور 5- آزاسيتيدين و فاكتور رشد فيبروبلاستي بررسي شد. سپس بيان سلول‌هاي تمايزي در سطح پروتيين و mRNA به‌وسيله رنگ‌آميزي ايمونوفلورسنت و real-time quantitative PCR بررسي گرديد. نتايج: براساس آناليز فلوسايتومتري ، اين سلول‌ها به‌طور معمول، ماركرهاي سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي شبيه CD105، CD73، CD44و CD166 همچنين OCT-4 به‌عنوان يك ماركر جنيني را بيان كردند. سلول‌هاي تمايزداده‌شده، ماركرهاي سلول‌هاي كارديوميوسيتي را در سطح mRNA و پروتيين بيان كردند. سلول‌هاي كارديوميوسيت تمايزيافته از اين سلول‌ها براي پروتيين Connexin-43 و troponin T2 (TNNT2) مثبت بودند. همچنين mRNA ، Connexin-43،Connexin-40، Alpha actinin، Tropomyosin1 و TNNT2 در سطح بالايي در سلول‌هاي تمايزي بيان گرديد. نتيجه‌گيري: براساس داده‌هاي ما سلول‌هاي بنيادي مشتق از خون قاعدگي، جمعيت سلولي منحصربه‌فردي هستند كه توانايي تمايز به سلول‌هايي با ويژگي‌هايي كه به‌طور معمول، به سلول‌هاي كارديوميوسيت نسبت داده مي‌شود دارند.

Background and Objective: In recent decades, stem cell therapy has been introduced as a novel therapeutic approach for patients suffering from cardiac disorders. Recently, identification of menstrual blood-derived stem cells (MenSCs) as a unique source of stem cell with some characteristics as well as ease of access, high proliferative ability and renewability has created enormous promise for cell therapy. Materials and Methods: In this study, differentiation ability of MenSCs into cardiomyocytes has been investigated. After MenSCs immunophenotyping, their differentiation into cardiomyocyte was investigated in the presence of 5-azacytidine and basic-fibroblast growth factor. Then, expression of the putative myogenic cells at mRNA and protein levels was determined by immunofluorescent staining and real-time quantitative PCR. Results: Based on flow cytometric analysis, the isolated MenSCs typically expressed mesenchymal stem cell markers like CD105, CD73, CD44 and CD166 in parallel to OCT-4 as an embryonic marker. The differentiated MenSCs expressed cardiomyocyte markers at mRNA/protein level. The myogenic cells differentiated from MenSCs were positive for Connexin-43 and troponin T2 (TNNT2) protein. The mRNAs of Connexin-43, Connexin-40, Alpha actinin, Tropomyosin1 and TNNT2 were highly expressed in the differentiated myogenic cells. Conclusion: Based on our data, MenSCs are a unique cell population with differentiation ability into cells with characteristics commonly attributed to cardiomyocytes.