بهينه سازي شرايط PCR براي دو ژن CHD-W و CHD-Z جهت تفكيك جنسيت در قناري

در گونه هاي بسياري از پرندگان من جمله قناري ها، جنس نر و ماده قبل از بلوغ فاقد هر گونه تفاوت در شكل ظاهري مي باشند. از آنجاييكه صداي دلنشين قناري توسط جنس نر ايجاد مي شود، لذا تفكيك جنسيّت قناري ها قبل از بلوغ از لحاظ اقتصادي بسيار حايز اهمّيّت مي باشد. ژن هاي موجود بر كروموزوم هاي جنسي به خاطر منحصر به جنس بودنشان مي توانند براي تفيين جنسيت به روش مولكولي مورد استفاده قرار گيرند. با استفاده از روش PCR و بر اساس دو ژن CHD-W و CHD-Z تفكيك جنسيّت در قناري ها صورت گرفته است. هدف از اين مطالعه بهينه سازي PCR بر اساس دو ژن CHD-W و CHD-Z در تفكيك جنسيّت در قناري بود. در اين مطالعه از 42 قناري دو پر حاوي ريشه تهيه گرديد و استخراج DNA از بالب پرها صورت پذيرفت و از پرايمرهاي اختصاصي طراحي شده براي تكثير توالي ژن W-CHD استفاده شد و با بهينه سازي شرايط PCR برنامه بهينه به صورت زير به دست آمد: واسرشته سازي اوّليه 42 درجه سانتيگراد به مدّت 5 دقيقه، 55 سيكل با شرايط : 42 درجه سانتيگراد به مدّت 06 ثانيه ، 55 درجه سانتيگراد به مدّت 55 ثانيه و دماي 24 درجه سانتيگراد به مدّت 56 ثانيه و در نهايت دماي 24 درجه سانتيگراد به مدت 5 دقيقه. اين مطالعه نشان داده شد كه روش بهينه شده PCR مي تواند با دقت صد درصد جنسيت قناري را تعيين كند و لذا مناسب ترين روش براي تعيين جنسيّت قناري است.

Bird species are considered sexually monomorphic, so in many bird species, the sex identification is very difficult especially in young birds. Since male canary is more important in warbling, sex identification of canary before puberty is important financially. Molecular genetic techniques can be use for sex identification of animals. Genes on the sex chromosomes are unique because of their sex-specific inheritance. PCR method based on chromo helicase DNA binding protein genes (CHD-Z and CHD-W) has been explained for sex identification in canary. The aim of the present study was to optimize of the PCR conditions for CHD-Z for sex identification in the canary. In this study genomic DNA was extracted from feather bulb of 24 canaries (old and young) of canary. PCR reaction was performed by a set of primers designed on the basis of the sequence of the CHD-W gene and optimized conditions was determined as follow: 94°C, 5min for initial denaturation then 35 cycle of 94°C for 60 sec, 58°C for 35sec, 72°C for 50sec, and a final 72°C for 5min. This study showed optimized PCR can be used for sex identification of canary with high accuracy. Therefore, it is the best method for this purpose.