مطالعه سطوح بيان گيرنده‌هاي چسبندگي پلاكتي در فراورده‌هاي پلاكتي تغليظ شده از پلاسماي غني از پلاكت

The expression levels of platelet adhesive receptors in PRP derived platelet concentrates during storage

زمینه و هدف: Platelet receptor glycoprotein Ibα (GPIbα) از كمپلكس رسپتوری GPIb-IX-V وPlatelet glycoprotein VI (GPVI) از جمله مهمترین گیرنده‌های پلاكتی هستند كه در فرایند تشكیل لخته دخیل می‌باشند. GPIbα در شروع فرایند تشكیل لخته در شرایط جریان خون سرخرگی نقشی اساسی دارد در حالی‌كه GPVI فارغ از میزان شدت جریان خون عروقی، در چسبندگی پایدار پلاكت‌ها دخالت می‌نماید. از آنجایی‌كه افزایش زمان نگهداری تاثیرات سویی بر عمكرد پلاكت‌ها دارد مطالعه الگوی بیان این گیرنده‌ها در طول نگهداری فراورده‌های پلاكتی از نظر كیفی واجد اهمیت می‌باشد. روش بررسی: این یك مطالعه تجربی است كه در سال 1393 بر روی فراورده‌های پلاكتی حاصل از Platelet-rich plasma (PRP) تولیدی سازمان انتقال خون ایران انجام پذیرفته است. در این راستا پنج كیسه كنسانتره پلاكتی به‌مدت پنج روز نگهداری شدند و سطوح بیان GPIbα و GPVI در آن‌ها برحسب مقادیر میانگین شدت فلورسانس با فلوسایتومتری سنجیده شد. یافته‌ها: میزان بیان GPIbα در روز اول (9/5±86 Mean fluorescence intensity, MFI=) بود كه در روز سوم به (9/6±69 MFI=) كاهش (016/0P=) و در روز پنجم نیز به (7/7±61 MFI=) كاهش یافت (0094/0P=). بیان گیرنده GPVI نیز بر اساس MFI در روزهای یك، سه و پنج به‌ترتیب 3/3±6/20، 5/2±24 و 9/4±14 بود كه در روز پنجم نسبت به روز سوم با تفاوت معناداری كاهش یافت (0213/0P=). نتیجه‌گیری: با توجه به كاهش معنادار سطوح بیان GPIbα و GPVI در طول نگهداری پلاكت‌ها، به‌نظر می‌رسد كه استفاده از فراورده‌های كهنه‌تر پلاكتی، اثرات سویی را در عملكردهای چسبندگی و در نتیجه كارآیی پلاكت‌ها جهت مصارف بالینی به‌جای گذارد.

Background: Major platelet adhesive receptors that contribute significantly to thrombus formation include platelet receptor glycoprotein Ibα (GPIbα) of the GPIb-IX-V complex and platelet glycoprotein VI (GPVI). GPIbα plays a crucial role in platelet tethering to sub-endothelial matrix, which initiates thrombus formation at arterial shear rates, whereas GPVI is critically involved in platelets firm adhesion to the site of injury regardless of shear condition. During storage, platelets experience some changes that deleteriously affect the expression levels of platelet receptors, which in turn can alter platelet functional behaviors. Considering the important roles of GPIbα and GPVI in platelet adhesion, it seems that any dramatic changes in the expression levels of these receptors can influence adhesive function of transfused platelets. Thereby examining GPIbα and GPVI expression during the storage of platelet concentrates may provide some useful information about the functional quality of these products after transfusion. Methods: In our experimental study, 5 PRP-platelet concentrates were randomly obtained from Iranian Blood Transfusion Organization (IBTO). All the platelet products met the standard quality assessment based on AABB (American Association of Blood Banks) guidelines. Washed platelets were subjected to flowcytometry analysis for the evaluation of GPIbα and GPVI receptor expression in day 1, 3 and 5 after storage. Data were presented as mean fluorescence intensity (MFI) and analyzed by Kruskal-Wallis test with Dunn’s multiple comparison test. Results: The GPIbα expression on first day (MFI=86±5.9) was reduced three days after storage (MFI= 69±6.9). The expression levels continued to reduce until day 5 in which GPIbα expression was markedly decreased to (MFI= 61±7.7) (P= 0.0094). GPVI expression on the days 1, 3 and 5 after storage were 20.6±3.3, 24±2.5 and 14±4.9, respectively. The results showed a significant decrease of expression on day 5, compared to that in day 3 after storage (P= 0.0213). Conclusion: Our study showed significant decreases in the expression of platelet receptors GPIbα and GPVI after 5 days storage, suggesting a major defect in adhesive function of platelets during this term.