بررسي بنيادينگي سلول هاي مزانشيمي ژله وارتون بند ناف در طي تمايز به سلول هاي مشابه جرم

Evaluation Stemness of mesenchymal cells of human umbilical cord warton’s- jelly during differentiation to germ-like cells

سابقه و هدف: عوامل مختلفي مانند بيماري هاي مقاربتي، ضايعه هاي نخاعي و پرتودرماني پس از ابتلا به سرطان -هاي مختلف، كه نتيجه ي آن ها توليد ناكافي يا عدم توليد اسپرماتوزوييد مي باشد، منجر به ناباروري در مردان مي -شوند. امروزه با ايجاد فناوري سلول درماني با سلول هاي بنيادي مزانشيمي، درمان بسياري از بيماري ها امكان پذير شده است. در اين بين، سلول هاي بنيادي مزانشيمي ژله ي وارتون بند ناف انسان، به عنوان منبعي كه به فراواني در دسترس بوده و توسط سيستم ايمني فرد پس زده نمي شوند، مورد توجه قرار گرفته اند. نخستين قدم در استفاده از اين سلول ها، اثبات بنيادي بودن آن است. لذا در اين مطالعه به لحاظ مولكولي بنيادينگي اين سلول ها با بررسي بيان ژن هاي ,CD34 CD105و CD44 بررسي شد. مواد و روش ها: سلول هاي بنيادي از منطقه ژله وارتون بندناف جداسازي و كشت داده شدند، استخراج تمامي RNA از پاساژ سوم صورت گرفته و پس از سنتز cDNA، بيان ژن هاي بنيادي به روش RT-PCR بررسي شد. سپس سلول هاي مزانشيمي در معرض دوزهاي مختلف BMP4 و نيز محيط كشت شرايطي شده به دست آمده از سلول هاي بيضه اي موش-هاي نوزاد و نيز بستر نانوفايبر PLLA قرار گرفتند تا تمايز آن ها به سلول هاي مشابه جرم مورد بررسي قرار گيرد. يافته ها: نتايج نشان داد كه اين سلول ها از پتانسيل تكثيري قابل توجهي برخوردارند و ژن هاي CD105 , CD44 را قبل از تمايز بيان مي كنند ولي بيان ژن CD34 كه ماركر سلول هاي هماتوپويتيك مي باشد در آن مشاهده نمي شود. قرار دادن سلول ها در معرض محيط تمايزي پس از پاساژ سوم، آن ها را به سمت سلول هاي مشابه جرم سوق مي دهد. نتيجه گيري: كشت آزمايشگاهي و غني سازي سلول هاي جرم مشتق از منابع ديگر سلول هاي بنيادي مانند سلول هاي مزانشيمي بند ناف يك روش عملي براي تحقيق هاي اوليه ي رشد و نمو سلول هاي جرم است. سلول هاي بنيادي بندناف با بيان ژن هاي بنيادي، به عنوان يك استراتژي، براي درمان ناباروري مي تواند مورد استفاده قرار گيرد.

Introduction and purpose: Various factors, such as sexually transmitted diseases, spinal cord injuries and radiotherapy after catching various cancers, which is the result of insufficient or no production Spermatozoa, leading to infertility in men. Today, by creating of therapeutic cell technology with mesenchymal stem cells, it is possible to treat many diseases. Meanwhile, mesenchymal stem cells of human umbilical cord Whartonʹs Jelly, have been considered as a resource that is frequently available and not rejected by the immune system. The first step in using of these cells is proving that they are fundamental. Therefore, in this study molecular stemness these cells was investigated with evaluate genes expression of CD34, CD44, CD105. Method: Stem cells from the umbilical cord Whartonʹs jelly were isolated and cultured, total RNA was extracted from the third passage took place after the synthesis of cDNA, gene expression was determined by RT-PCR. The mesenchymal cells are exposed to different doses of BMP4 and medium terms obtained from newborn mice testicular cells and bed Nano fiber PLLA, To their differentiation into the germ-like cells be Examined. Results: The results showed that these cells have considerable proliferative potential and gene CD105, CD44 is expressed before the differentiation, but the expression of CD34, a marker of hematopoietic cells that is not seen. Putting the cells exposed to the distinction medium after the third passage, leads them to the germ-like cells. Discussion:Laboratory culture and enrich the germ cells derived from other sources such as umbilical cord mesenchymal cells is a practical method for the initial research and development germ cells. Umbilical cord stem cells expressed genes are a strategy can be used to treat infertility.