بيان ژن كاسپازـ9 در بافت بيضه موش صحرايي نژادSD تحت تأثير قارچ كش پروپيكونازول و اثرات حفاظتي سلنيوم

The Effect of Propiconazole and Protective Effects of Selenium Gene Expression Profile of Caspase 9 in the Testicular Tissue of Male Sprague Dawley (SD) Rats

زمینه و هدف: كونازول‌ها شامل تری‌آزول‌ها یا ایمیدیازول‌ها عوامل ضد قارچی هستند كه برای جلوگیری از رشد قارچ‌ها و برای درمان عفونت‌های قارچی استفاده می‌شوند. پروپیكونازول نیز كه در دسته كونازول‌ها قراردارد یك قارچ كش سیستمیك است كه به طور گسترده‌ای در ایران و سایر كشورها جهت سم‌زدایی دانه‌های غلات به خصوص برنج استفاده می‌شود. این قارچ‌كش از طریق مهار یك سیتوكروم خاصP450 ،  CYP 51  (Lanosterol – 14α- demethylase) عمل می‌كند كه یك مرحله اصلی در بیوسنتز آرگوسترول، یك استروئید مورد نیاز برای شكل گیری دیواره سلولی قارچ‌ها است، لذا در تحقیق تجربی حاضر اثر قارچ كش پروپیكونازول بر بیان ژن كاسپاز 9 به عنوان آغازگر فرآیند آپوپتوز و اثرحفاظتی احتمالی سلنیوم مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: در این مطالعه تجربی 40 رت نژاد اسپراگ داولی به 10 گروه 4 تایی تقسیم شدند. این گروه‌ها عیارتند از؛ كنترل، شم1 (حلال پروپیكونازول: آب مقطر)، شم2 (حلال سلنیوم:  نرمال سالین)،1 گروه دریافت كننده 5/0 میلی‌گرم بر كیلوگرم سلنیوم ، 3 گروه دریافت كننده پروپیكونازول در سه دوز 10 ، 50 و 75 میلی‌گرم بر كیلوگرم و 3 گروه دریافت كننده پروپیكونازول در سه دوز 10 ، 50  و 75 میلی‌گرم بر كیلوگرم پروپیكونازول همراه با 5/0 میلی‌گرم بر كیلوگرم سلنیوم(جهت بررسی تأثیر حفاظتی سلنیوم). تزریق به مدت 2 هفته، یك روز در میان به صورت درون صفاقی انجام شد. سپس  با استفاده از  روشRT-PCR و برنامه Total Lab بیان ژن كاسپاز 9 در بیضه تمام گروه‌ها مورد بررسی قرار گرفت. داده‌ها با استفاده از روش‌های آماری توصیفی تجزیه و تحلیل شدند. یافته‌ها: بیان ژن كاسپاز 9 در تمام گروه های تجربی (گروه های پروپیكونازول و پروپیكونازول با سلنیوم) در مقایسه با گروه‌های كنترل و شم افزایش معنی‌داری را نشان داد. این یافته‌ها می‌توانند بیانگر این باشند كه 5/0 میلی گرم بر كیلوگرم سلنیوم، دوز مصرفی  مناسبی برای ایجاد حفاظت در این تحقیق نمی‌باشد. نتیجه‌گیری: افزایش معنی‌دار در بیان ژن كاسپاز 9 در تمام گروه‌های تجربی در مقایسه با گروه كنترل بیانگر فعال شدن آپوپتوز و عدم تأثیر سلنیوم برای حفاظت بیضه در برابر آسیب‌های القا شده است .

Background & aim: Conazoles including imidazoles or triazoles are anti- fungal agents widely used to prevent fungal growth and their infections. Propiconazole placed in this group is a systemic fungicide used widely for detoxification of cereal seeds especially rice in Iran and other countries. This fungicide were designed to inhibit a specific cytochrome P450, CYP51 (lanosterol-14-α- demethylase), a critical step in the biosynthesis of ergosterol, a steroid required for the formation of the fungal cell wall. In the present experimental study, the effect of propiconazole on Caspase 9 gene expression profile as an initiator of apoptotic process and protective effect of selenium were investigated. Methods: Forty SD rats were divided into 10 groups of 4,  including : control , sham1 (solvent of propiconazole, distilled water), sham 2 (solvent of selenium, normal saline) and 1 group received 0.5 mg/kg selenium ,3 groups received propiconazole in doses of 10,50,75  mg/kg and 3 groups received propiconazole in doses of 10,50,75 mg/kg propiconazole with 0.5 mg/kg of selenium. Injections were intrapritoneal for two weeks in alternate days. Then, using RT-PCR and Total Lab program gene expression of caspase-9 testicular of all groups were studied. Data were analyzed using descriptive statistics. Results:  A significant increase of caspase 9 expression were observed among all experimental groups compared to control and sham groups. These findings indicated that 0.5 mg/kg selenium is not a suitable dose to create protection in this experimental study.  Conclusion: The significant increase in Caspase 9 gene expression profile observed in all experimental groups as compared to control suggests activation of apoptosis and inefficacy of selenium to protect the testis against induced damages.