شناسايي ايزوله‏هاي انتروباكتر توليدكننده ESBL و داراي ژن blaSHV جداشده از عفونت‏هاي گردش خون در طي 10 سال در جنوب ايران (شيراز)

Identification of ESBL-producing and blaSHV gene Harboring Enterobacter spp. Isolated from Bloodstream Infections of Hospitalized Patients during 10 Years in South of Iran (Shiraz)

زمينه: در تمام جهان مقاومت چند دارويي در بين باكتري‏هاي گرم منفي ايجادكننده عفونت‏هاي بيمارستاني يا اكتسابي از جامعه در حال ظهور است. اهداف اين مطالعه شامل: (1) تعيين پروفايل حساسيت آنتي‏بيوتيكي ايزوله‏هاي انتروباكتر جداشده از خون، (2) شناسايي فنوتايپي سويه‏هاي توليدكننده ESBL و AmpC، (3) شناسايي سويه‏هاي MDR، (4) شناسايي ايزوله‏هاي داراي ژن blaSHV با استفاده از روش PCR، بودند. مواد و روش‌ها: اين مطالعه مقطعي بر روي 90 ايزوله‏ انتروباكتر كه در طي 10 سال (1393-1384) از عفونت گردش خون ارسالي از بيماران بستري در بيمارستان‏هاي شهر شيراز با استفاده از سيستم اتوماتيك BACTEC 9240 جدا شده بودند، انجام شد. ايزوله‏ها با استفاده از تست‏هاي بيوشيميايي تعبيه شده در سيستم API 20E اختصاصي انتروباكترياسيه مجدداً مورد شناسايي نهايي قرار گرفتند. بر اساس پروتكل ارايه ‏شده توسطCLSI در سال 2014، از روش استاندارد ديسك ديفيوژن و تست فنوتيپي DDST به ترتيب براي تست حساسيت آنتي‏بيوتيكي و شناسايي سويه‏هاي توليدكننده ESBL استفاده شد. از روش ملكولي PCR براي شناسايي سويه‏هاي داراي ژن blaSHV استفاده شد. يافته‌ها: در اين مطالعه مروپنم (9/98 درصد) و ايمي‏پنم (6/95 درصد) و كليستين (3/93 درصد) موثرترين آنتي‏بيوتيك‏ها بر عليه ايزوله‏ها بودند. در بين سفالوسپورين‏هاي نسل سوم مورد بررسي ايزوله‏ها بهترين پاسخ را به سفتازيديم (8/47 درصد) و پس از آن به سفترياكسون (2/42 درصد) نشان دادند. نتايج بررسي نشان داد كه 1/11 درصد ايزوله‏ها MDR هستند. 5/15 درصد ايزوله‏ها همزمان ESBL مثبت و AmpC مثبت بودند. نتايج انجام PCR به منظور جستجوي ژن blaSHV در ايزوله‏هاي انتروباكتر مشخص كرد كه 8/7 درصد سويه‏ها داراي اين ژن بوده‌اند. نتيجه‌گيري: نتايج نشان مي‏دهد مقاومت ايزوله‏هاي انتروباكتر به نسل سوم سفالوسپورين‏ها به يك مشكل تهديد كننده سلامت ملي تبديل شده است. انجام مطالعات اپيديمولوژيك كشوري به منظور ارايه برنامه جامع ملي جهت جلوگيري از ظهور و گسترش باكتري‏هاي مقاوم در كشور حياتي است. ما معتقديم به منظور حفظ كارباپنم‏ها به عنوان راهكار نهايي جهت درمان گونه‏هاي انتروباكتر، كارباپنم‏ها بايد براي درمان ايزوله‎هاي مقاوم به ديگر آنتي‏بيوتيك‏ها استفاده شوند.

Background: Multidrug resistance is emerging among gram negative bacteria that cause hospital infections or community acquired around the world. The aims of this study were (1) determination of antibiotic susceptibility profile of Enterobacter spp. isolates recovered from blood, (2) phenotypic identification of ESBL and AmpC-producing isolates, (3) identify MDR strains, and (4) identification isolates harboring blaSHV gene using PCR method. Materials and Methods: In this cross-sectional study, 90 isolates of Enterobacter spp. isolated from blood stream infection from patients admitted to hospitals in Shiraz using BACTEC 9240 automated system during 10 years (2004-2014). The isolates again were identified by using embedded biochemical tests in the Enterobacteriaceae API-20E diagnostic system. According to proposed protocol by CLSI (2014), standard disc diffusion method and DDST phenotypic test were used for antibiotic susceptibility test, and identification of ESBL-producing strains, respectively. PCR molecular method was used to identify blaSHV gene in strains. Results: In this study, as observed, meropenem (98.9%), imipenem (95.6%) and colistin (93.3%) were the most effective antibiotics against isolates. Isolates showed the best response to ceftazidime (47.8%) and ceftriaxone (42.2%), respectively, among the third generation of cephalosporins which were investigated. Results showed that 11.1% of isolates were MDR. 15.5% isolates were positive ESBL and positive AmpC, simultaneously. As revealed, 11.1% of isolates were MDR. The results of PCR to search for blaSHV gene in Enterobacter isolates revealed that 7.8% of the strains harboring this gene. Conclusion: Results showed that the resistance of Enterobacter isolates to the third generation of cephalosporins has become a national health-threatening problem. Epidemiologic studies are crucial in order to presentation of comprehensive national program to preventing emergence and dissemination of resistant bacteria in the country. We believe that carbapenems should be used for the treatment of strains resistant to other antibiotics in order to preservation of carbapenems as strategies for the treatment of Enterobacter spp.