شناسايي و بررسي خواص پروبيوتيكي باكتري هاي اسيد لاكتيك بومي بر اساس ويژيگي هاي فنوتيپي و ژنوتيپي

Identification and Characterization of Probiotic Properties of Indigenous Lactic Acid Bacteria Based on Their Phenotypic and Genotypic Characteristics

زمينه و اهداف: پروبيوتيك ها مكمل هاي غذايي ميكروبي هستند،كه با ايجاد تعادل ميكروبي روده اثرات مفيدي بر روي ميزبان مي گذارند .در اين مطالعه، هدف ما شناسايي و بررسي خواص پروبيوتيكي باكتري هاي اسيد لاكتيك بومي بر اساس ويژيگي هاي فنوتيپي و ژنوتيپي است. مواد و روش ها: تعدادي از باكتري هاي اسيد لاكتيك جدا شده از محصولات لبني براساس ويژگي هاي فنوتيپي شناسايي و سپس جهت ارزيابي خصوصيات پروبيوتيكي مورد بررسي قرار گرفتند. نمونه ها از نظر مقاومت به اسيد و نمك صفرا، فعاليت ضد ميكروبي، كاهش كلسترول مورد آزمايش قرار گرفته و آنهايي كه به عنوان پروبيوتيك شناسايي شدند به وسيلهي پرايمر هاي عمومي 16SrRNA تعيين توالي و در سطح گونه شناسايي و ثبت گرديدند. يافته ها: از 20 نمونه باكتري هاي اسيد لاكتيك جدا شده، 3 نمونه نسبت به شرايط اسيدي (2/5 pH) و 5 نمونه به در صد هاي متفاوت نمك صفرا (10/3) مقاوم بودند. از بين اين 5 نمونه، 3 نمونه به طور قابل توجهي توانايي كاهش كلسترول در عرض 2 ساعت انكوباسيون به ميزانهاي 95/73، 94/8 و 97/82 درصد را نشان دادند. در انتها 5 نمونه براساس 16SrRNA تعيين توالي و به عنوان L. plantarum سويه 22SN ,NPN0022SN ,24SN, 10 و Lactobacillus rhamnosus SN30 شناسايي شدند. نتيجه گيري: باكتري هاي اسيد لاكتيك جدا شده در اين مطالعه داراي خواص پروبيوتيكي بوده و مي توانند در آينده به عنوان پروبيوتيك در محصولات انساني و دام و طيور مورد استفاده قرار گيرند.

Background: Probiotic are live microbial food supplement which bestows beneficial effects on the host by creating intestinal microbial balance. In this research, we aimed to identify locally isolated LAB with probiotic potentials by phenotypic and genotypic methods. Material and methods: A number of locally isolated LAB identified by phenotypic characteristics were selected and screened for their probiotic properties. The isolates were tested for their acid and bile resistance, antibacterial activity, cholesterol reducing. The selected probiotic LAB were identified to species level by using universal primers and 16S rRNA sequencing. Results: Among the 20 LAB isolates, only 3 isolates resisted low pH value of 2.5, while 5 isolates resisted 0.3 to 1% bile salt. Among these 5 isolates, 3 isolates showed the ability to lower cholesterol significantly as they reduced 94.8, 95.73 and 97.82 % of cholesterol within 2 hours of incubation. All isolates except for 24SN hydrolyzed bile salt. Based on 16S rRNA sequencing these 5 isolates were identified as Lactobacillus plantarum (22SN, 24SN, NPN0022, 10SN), and Lactobacillus rhamnosus (30SN). Conclusion: The LAB isolates in this study possessed significant probiotic properties and might be used as a probiotic in human, livestock, and poultry products in the future.