آناليز عملكرد پيش بر مصنوعي SP-DD با استفاده از روش اگرواينجكشن در گياه توتون

پيش برهاي مصنوعي القاپذير با بيمارگرها (Synthetic pathogen-inducible promoters) جايگزين مناسبي براي پيش برهاي طبيعي در دست ورزي ژنتيكي گياهان با هدف توليد ارقام مقاوم مي­باشند. يك پيش بر القاپذير با بيمارگر در شرايط ايده­آل بايد تنها در پاسخ به بيمارگرهاي هدف فعال شود و ژن مقاومت به بيمارگر را به صورت موضعي و موقتي بيان­ كند. فقدان اين ويژگي­ها در پيش برهاي طبيعي، توجه را به سمت طراحي پيش برهاي مصنوعي معطوف داشته است. در ساختار اين پيش برها از اجزائي چون عناصر تنظيمي سيس استفاده مي­شود كه اين امر انعطاف پذيري بالايي را در تعيين ميزان بيان و نوع القاپذيري يك پيش بر مهيا مي نمايد. يكي از متداول ترين روشهاي آناليز يك پيش بر مصنوعي القاپذير با بيمارگر، استفاده از روش بيان موقت مبتني بر اگروباكتريوم مي باشد. با اعمال تيمارهاي زيستي و غير­زيستي و مطالعه بيان تراژن، آناليز عملكرد پيش بر در زمان كوتاهي قابل انجام است. در اين تحقيق، پيش بر مصنوعي SP-DD (متشكل از دو نسخه از عنصر تنظيمي و القايي سيس D Box از منشاء پيش بر ژن PR2 گياه جعفري) در اتصال با ژن گزارشگر بتاگلوكرونيداز اينتروندار طبق روش اگرواينجكشن به برگ هاي گياه توتون گونه بنتاميانا (Nicotiana benthamiana) منتقل شد و عملكرد آن در واكنش به تيمار ساليسيليك اسيد و تنش هاي محيطي بررسي گرديد. نتايج نشان داد پيش بر مصنوعي SP-DD در پاسخ به ساليسيليك اسيد، ژن بتاگلوكرونيداز را بيان كرد و ميزان بيان با گذشت زمان از ۲ ساعت به ۲۴ ساعت از اعمال تيمار، افزايش نشان داد. همچنين پيش بر فوق به تنش­هاي گرما و سرما حساسيت اندكي نشان داد ولي تنش اشعه ماوراء بنفش بر القاء آن بي­اثر بود.