بررسي تغيير ژن پروتئين M2 ويروس آنفلوانزا H1N1 در بيان آن درباكتري Ecoli سويه BL21

Evaluation of Modification in M2 gene of Influenza H1N1 virus in Expression of it in BL21 Ecoli

سابقه و هدف: با توجه به اهميت توالي ژن و كدونهاي مربوط به هر اسيد آمينه در ميزبان بيان كننده پروتئين، همچنين به منظور توليد احتمالي واكسن بر عليه انفلوانزا A، يكي از عوامل اصلي مرگ ومير ساليانه در جهان، اين تحقيق انجام گرفته است. پروتئين M2 حفاظت شده است و بعد از تغيير در توالي آن به نظر ميرسد هدف مناسبي براي توليد واكسن انفلوانزا در نظر گرفته شود. روش بررسي: تحقيق به روش تجربي انجام شد. توالي ژن M2 از ويروس سويه H1N1 ايران انتخاب و بعد از اعمال تغييرات جهت بيان بهتر در باكتري Ecoli سنتز شد.سپس در وكتور pET22b ساب كلون گرديد. پروتئين نوتركيب در باكتري E.coli سويه BL21DE3 بيان و از آنتي بادي اختصاصي در روش وسترن بلات براي تاييد آن استفاده شد. يافته ها: Ecoli با تغيير اعمال شده قادر به بيان پروتئين M2 باغلظت 300 ميكروگرم در هر ميلي ليتر بود و با آنتي بادي اختصاصي نيز ماهيت آن تاييد گرديد. نتيجه گيري: پروتئين M2 ويروس آنفلوانزا با تغييراتي در توالي آن در باكتري Ecoli سويه BL21 قابل بيان است.

Aim and Background: By Attention to gene sequence and each amino acid codon in host which express protein, also in order to probable vaccine production against influenza A, a major cause of mortality in a year,this research was carried out. M2 protein is conserved and it can be a proper candidate vaccine for influenza infection. Materials and Methods: Present research was an experimental study. The sequence of M2 protein of Iran influenza virus H1N1 strain was modified and synthesized. It was subcloned into pET22b vector recombinant protein and expressed in BL21 Ecoli and confirmed with specific antibody by western blot technique. Results: The modified M2 gene was expressed in Ecoli. The concentration of it was 300mu;g/ml and it was confirmed by western blotting with specific antibody. Conclusion: Influenza M2 protein with modification in sequence could be expressed in BL21 Ecoli host.