بررسي اثر هورمون هيدروكورتيزون بر آسيب‏هاي كلاستوژنيك كروموزومي القايي در رده سلولي L929 با استفاده از آزمون ميكرونوكلئوس در سلول‏هاي دو هسته اي

Investigating the Effects of Hydrocortisone Hormone on Induced Clastogenical Chromosomal Abnormalities on L929 Cell Line Using Micronucleus Assay on Binucleated Cells

هدف: در اين مطالعه، تاثير استرس بر القاي آسيب‏هاي ساختاري كروموزومي در شرايط in vitro در رده سلولي L929 با استفاده از آزمون ميكرونوكلئوس در سلول‏هاي دو هسته‏اي مورد بررسي قرار گرفت. مواد و روش‏ها: ‌‌‌رده سلولي L929در محيط DMEM، حاوي 10 درصد FBS كشت داده شد. سلول‏ها به چهار گروه آزمايشي شامل كنترل، گروه تيمار با Gy2 اشعه گاما، گروه تيمار با غلظت‏هاي 25، 50 و 100 ميكروگرم بر ميلي‏ليتر هيدروكورتيزون و گروه تيمار با سه غلظت مختلف هيدروكورتيزون همراه با اشعه گاما تقسيم بندي شدند. سلول‏هاي تيمار شده، برداشت و رنگ آميزي شدند و شمارش صدمات كروموزومي با استفاده از آزمون ميكرونوكلئوس انجام شد. نتايج: نتايج نشان داد كه هيدروكورتيزون در مقايسه با گروه كنترل سبب القاي ميكرونوكلئوس نشده است. اگر چه فراواني ميكرونوكلئوس در سلول‏هاي تيمار شده هم‏زمان با غلظت‏هاي مختلف هيدروكورتيزون و اشعه به‏طور معني‏داري بيش‏تر از  سلول‏هاي  فقط اشعه ديده بود (p<0/05). نتيجه گيري: بر اساس يافته‏هاي اين مطالعه، هورمون‏هاي استرس‏زا به‏تنهايي قادر به القاي آسيب كروموزومي نيستند، اما مي‏توانند سلول‏ها را نسبت به اثرات كلاستوژنيك اشعه آسيب پذيرتر نمايند.

Aim: In this study the effects of stress on induction of structural chromosomal abnormalities on L929 cell line using micronucleus assay on cytokinesisblocked binucleated cells were investigated in vitro. Material and methods: L929 cells were cultured in DMEM containing 10% FBS. The cells were divided into four groups including control, 2Gy gammairradiated cells, and cells treated with doses of 25, 50 and 100 µg/ml hydrocortisone, and cells cotreated with these three doses of hydrocortisone and irradiation. The treated cells were harvested, stained and chromosome abnormalities were scored using micronucleus assay. Results: Results showed that hydrocortisone did not induce micronuclei as compared to the control group. However, the frequency of micronuclei in cells cotreated with doses of hydrocortisone and irradiation was significantly higher than cells treated only with gamma irradiation (P<0.05). Conclusion: According to the data of this study, stress hormones are not able to induce any chromosomal abnormalities however, they are able to increase the cell susceptibility to clastogenic effects of irradiation. Key words: Stress, Hydrocortisone, L929, Gamma ray, Micronucleus