جهش‌هاي موجود در ژن nalC در سويه‌هاي سودوموناس آيروزينوزا مقاوم به سيپروفلوكساسين جدا شده از بيمارستان‌ها و آزمايشگاه‌هاي استان گيلان در سال‌هاي 94 -1393

Mutations in nalC gene in ciprofloxacin resistant strains of Pseudomonas aeruginosa isolated from hospitals and laboratories of Guilan province in 2014-2015 years

Mutations in nalC gene in ciprofloxacin resistant strains of Pseudomonas aeruginosa isolated from hospitals and laboratories of Guilan province in 2014-2015 years

زمينه و هدف: سودوموناي آيروژينوزا يك پاتوژن فرصت طلب بيمارستاني است كه به خاطر مقاومت ذاتي و اكتسابي به طيف گسترده‌اي از آنتي‌بيوتيك‌ها تهديدي براي مراقبت‌هاي كلينيكال محسوب مي‌شود. يكي از مكانيسم‌هاي مقاومت دارويي در سودوموناس آيروژينوزا، جهش در ژن‌هاي تنظيم كننده منفي سيستم افلاكس پمپ نظير nalC مي‌باشد. هدف از اين مطالعه بررسي جهش‌هاي ژن nalC در جدايه‌هاي سودوموناس آيروژينوزا از بعضي بيمارستان‌هاي رشت و آزمايشگاه‌هاي لاهيجان بود. مواد و روش‌ها: در اين مطالعه مقطعي 45 سويه سودوموناس آيروژينوزا در يك مقطع يك ساله از چندين بيمارستان رشت و آزمايشگاه لاهيجان جداسازي شدند و به كمك روش‌هاي بيوشيميايي تعيين هويت شدند. حساسيت و مقاومت به آنتي‌بيوتيك به روش كربي بور و مايكرودايلوشن تعيين گرديد. سپس به روش PCR- سكونسينگ جهش‌هاي ژن nalC در جدايه‌هاي مقاوم به سيپروفلوكساسين بررسي گرديد. يافته‌ها: در اين مطالعه بيش‌ترين جدايه‌هاي سودوموناس آيروژينوزا از نمونه‌هاي ادراري (53 درصد) و سپس نمونه‌هاي سوختگي (31 درصد) جمع‌آوري شد. بيش‌ترين ميزان مقاومت نسبت به اريترومايسين (100 درصد) و كم‌ترين ميزان مقاومت نسبت به سيپروفلوكساسين (31 درصد) مشاهده گرديد. بالاترين ميزان MIC سيپروفلوكساسين در بعضي از نمونه‌ها بيش از?g/ml 512 تعيين گرديد. نتايج سكونسينگ نشان داد كه 12 جدايه مقاوم به سيپروفلوكساسين داراي يك يا چند جهش بدمعني G71E ،S209R و E153Q در ژن nalC بودند. نتيجه‌گيري: با توجه به اين كه جهش در اغلب جدايه‌ها در اين مطالعه تعيين شده، به نظر مي‌رسد جهش در ژن nalC نقش مهمي در ايجاد مقاومت به سيپروفلوكساسين در جدايه‌هاي بيمارستاني سودوموناس آيروژينوزا در استان گيلان داشته باشد.

Abstract Background: Pseudomonas aeruginosa is a major nosocomial pathogen that due to its intrinsic and acquired resistance to a wide spectrum of antibiotics poses a threat in clinical settings. One of the drug resistance mechanisms in P. aeruginosa is mutation in negative regulators of efflux pump systems such as nalC. The aim of this study was investigation of nalC mutations in P. aeruginosa isolates from some Rasht hospitals and Lahijan laboratories. Materials and Methods: In this cross-sectional study, forty-five P. aeruginosa strains was isolated from several Rasht hospitals and Lahijan laboratories between 2013 to 2014 and identified by biochemical tests. The antibiotic resistance and susceptibility of isolates was determined by Kirby Bauer method and microdilution method. Then PCR-sequencing was carried out to assess nalC mutations in ciprofloxacin resistant isolates. Results: In this study, the most P. aeruginosa strains was isolated from urine sample (53%), followed by burned strains (31%). The most resistance was seen to erythromycin (100%) and the lowest resistance was seen to ciprofloxacin (~31 %). The highest MIC of ciprofloxacin was determined in some strains > 512 ?g/ml. Sequencing results showed that 12 ciprofloxacin resistant isolates had one or several missense mutations G71E, S209R and E153Q in nalC gene. Conclusion: Given that mutation was defined in most isolates in this study, it seems that mutation in nalC gene plays an important role in ciprofloxacin resistance of nosocomial P. aeruginosa isolates in Guilan province.