القا توقف چرخه سلولي در مرحله G1 و افزايش درصد Sub - G1 متعاقب تيمار سلول‌هاي Nalm - 6 با مهاركننده سنتتيك hTERT

Induction of G1 Cell Cycle Arrest and Increased Sub-G1 Population upon Treatment of Nalm-6 Cells with Synthetic Inhibitor of hTERT

چكيده سابقه و هدف به دليل نقش تلومراز در تكثير نامحدود اكثر سلول هاي سرطاني از جمله بدخيمي هاي خوني، مهار تلومراز به عنوان روش مناسبي جهت درمان سرطان ها مطرح مي باشد. هدف از مطالعه، بررسي اثر BIBR1532 كه يك مهاركننده سنتتيك hTERT مي باشد، بر روي فعاليت متابوليك، ميزان ساخت DNA ، تغييرات چرخه سلولي و بيان ژن هاي p21، p73، Bax و Bad در سلول هايNalm-6 (رده سلولي لوسمي لنفوبلاستيك حاد) بود. مواد و روش‌ها در اين مطالعه تجربي به منظور بررسي اثر BIBR1532 ، سلول ها در حضور غلظت هاي مختلف دارو كشت داده شدند و متعاقباً آزمون هاي BrdU cell proliferation assay ، Microculture Tetrazolium Test،Flowcytometeric cell cycle arrest و Quantitative real-time انجام شد. يافته‌ها نتايج به دست آمده نشان داد كه BIBR1532 داراي اثر مهاري بر فعاليت متابوليك و ساخت DNA سلول-هاي رده Nalm-6به طور وابسته به دوز و زمان مي باشد. هم چنين نتايج حاكي از افزايـش بيـانmRNA ژن‌هايBad ، Bax ،p73 و p21 بود كه خود متعاقباً با توقف چرخه سلولي در مرحله G1 و افزايش مرحله Sub-G1 همراه مي باشد. نتيجه گيري از آن جايي كه تيمار با داروي BIBR1532 در رده سلولي Nalm-6 سبب القا توقف چرخه سلولي و فعال شدن مسير آپوپتوز مي گردد، لذا مي توان از افزوده شدن درمان هاي مبتني بر داروهاي آنتي تلومراز به عنوان يك استراتژي جديد در درمان مبتلايان به لوسمي لنفوبلاستيك حاد بهره جست.

Abstract Background and Objectives As the role of telomerase in unlimited proliferation is a common feature of the majority of human cancers including hematological malignancies, thus inhibition of this enzyme has been proposed as a novel strategy in cancer therapeutics. This study was performed to investigate the effect of BIBR1532, a synthetic inhibitor of hTERT, on metabolic activity, DNA synthesis rate, cell cycle activity, and expression of pro-apoptotic genes such as p21, p73, Bax, and Bad in Nalm-6 pre-B ALL cells. Materials and Methods In an experimental study, to investigate the effect of BIBR1532, Nalm-6 leukemic cells were cultured in the presence of various concentrations of the inhibitor and consequently MTT assay, BrdU cell proliferation assay, flowcytometeric cell cycle analysis, and quantitative real-time PCR were applied. Results Our results revealed that BIBR1532 induces an inhibitory effect on metabolic activity and DNA synthesis rate of Nalm-6 cells in a dose- and time-dependent manner. Moreover, we found that BIBR1532 exerts an inductive effect on mRNA expression level of Bax, Bad, p73, and p21, which in turn leads to G1 cell cycle arrest and increased sub-G1 cell population. Conclusions Since treatment with BIBR1532 could arrest the cell cycle activity in Nalm-6 cells and activate cellular apoptotic pathway, anti-telomerase-based therapy may be regarded as a novel promising strategy for ALL treatment.