هدف گيري ذرات فاژي M13 با پروتئين هولوترانسفرين انساني به روش اتصال شيميايي

زمینه و اهداف: انتقال هدفمند ناقل ها و حامل های ژنی به سلول ها و بافت های خاص یكی از مهمترین مسائل در آزمایش های ژن¬درمانی است. باكتریوفاژها حامل های ژنی مناسبی هستند و روش های مختلفی برای انتقال هدفمند آن ها به سلول های مورد نظر وجود دارد. در این مطالعه تهیه ذرات فاژی هدفمند شده بر پایه فاژ M13 به روش اتصال شیمیایی ارائه می شود. مواد و روش ها: ابتدا سازه فاژمیدی pCMV-Script-GFP از ذرات فاژی GFP توسط فاژ كمكی ExAssist به روش برش درون سلولی با استفاده از سویه میزبان اختصاصی XLOLR برش و با استفاده از فاژ كمكی R408 ذرات فاژیM13حاوی ژن GFP (M13-GFP)تولید شدند. سپس ملكول های پروتئین هولوترانسفرین انسانی با روش اتصال شیمیایی آمیناسیون احیایی به سطح ذرات فاژی حاصل اتصال داده شدند. اتصال ملكول¬های ترانسفرین به سطح ذرات فاژی با روش phage-ELISA بررسی شد. یافته ها: آزمایشات phage-ELISA نشان داد كه اتصال ملكولهای ترانسفرین به سطح ذرات فاژی به درستی انجام گرفته و ذرات فاژیM13 هدفگیری شده با ترانسفرین تهیه شده است. بررسی های بیشتر نشان داد كه تقریباً 485 مولكول ترانسفرین به هر ذره فاژی متصل شده است. نتیجه گیری: نتایج حاصل نشان می دهند كه روش اتصالات شیمیایی می تواند به عنوان راهكاری مناسب در هدفمندسازی ذرات فاژی M13 با اتصال مولكول های هدفگیری به تعداد زیاد به سطح آن ها مورد استفاده قرار گیرد.