بقا و مهاجرت سلول‌هاي نوروسفر مشتق از سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان بعد از پيوند به فضاي زير شبكيه در مدل تخريب ماكولاي وابسته به سن در موش‌هاي صحرايي آلبينو

Survival and migration of bone marrow derived neurosphere after transplantation into subretinal space in albino rat AMD model

چكيده زمينه و هدف: بيماري‌هاي تخريبي شبكيه يكي از علل شايع نابينايي در جهان است. هدف از اين مطالعه بررسي پيوند سلول‌هاي نوروسفر مشتق از بافت مغز استخوان به فضاي زير شبكيه در مدل حيواني (تخريب لايه رنگدانه دار شبكيه با استفاده از سديم يديت) بود. روش بررسي: موش‌هاي صحرايي آلبينو مقدار ?? ميلي‌گرم بر كيلوگرم از سديم يديت در فضاي پشت چشم دريافت كردند و بعد از ?? روز، بررسي بافتي با استفاده از هول مانت لايه رنگدانه دار و همچنين رنگ‌آميزي هماتوكسيلين و ايوزين انجام شد. سلول‌هاي بنيادي مشتق از بافت مغز استخوان از استخوان فمور موش‌هاي صحرايي استخراج و تحت تاثير محيط تمايزي نوروسفر به سلول‌هاي شناور نوروسفر تبديل شد. سلول‌هاي به‌دست‌آمده با نشانگر هسته‌اي BrdU نشان‌دار و به فضاي زير شبكيه تزريق شدند. ? روز بعد از تزريق، برش بافتي تهيه شد و بقا، مهاجرت و همچنين نحوه قرارگيري سلول‌هاي تزريق‌شده با استفاده از ايمونوهيستوشيمي بررسي شد. يافته‌ها: ? روز بعد از تزريق سديم يديت، تغييرات پاتولوژي ازجمله افزايش در نور فلويورسنس، هايپرتروفي و چندهسته‌اي شدن در لايه رنگدانه دار مشاهده شد و در بررسي بافتي، به‌هم‌ريختگي قسمت خارجي فوتورسپتور ها و همچنين تغييرات لايه رنگدانه دار ديده شد. يافته‌هاي ايمونوهيستوشيمي ? روز بعد از پيوند سلولي نشان داد كه سلول‌هاي تزريق‌شده توانسته‌اند در فضاي زير شبكيه زنده بمانند و به لايه رنگدانه دار و همچنين به لايه شبكيه مهاجرت كرده و در كنار سلول‌هاي بافت ميزبان قرارگرفته‌اند. نتيجه‌گيري: سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي به دليل سهولت در دسترسي، منبع مناسبي براي پيوند هستند. توانايي تمايز اين سلول‌ها به رده عصبي و همچنين توانايي بقا و مهاجرت اين سلول‌ها بعد از پيوند، در مدل‌هاي آسيب شبكيه، مي‌تواند راهي براي درمان بيمارهاي تخريبي شبكيه باشد. كليدواژه‌ها: سلول‌هاي نوروسفر، سلول‌هاي بنيادي مغز استخوان، سديم يديت، تخريب ماكولا وابسته به سن

ABSTRACT Background and Aim: Degenerative retinal diseases are among the common causes of blindness in the world. The purpose of this study was to investigate transplantation of neurosphere derived from bone marrow tissue into subretinal space in age related macular degeneration induced by injection of sodium iodate in animal model. Materials and Methods: 40 mg/kg of sodium iodate was injected into retro-orbital sinus of albino rats. Then histological investigation by flat-mount and hematoxylin and eosin staining was performed after 30 days. Bone marrow stromal stem cells isolated from albino rats femur, were cultured in the differentiation medium and induced into floating neurosphere. Differentiated cells were labeled with nuclear anti-BrdU and were transplanted into subretinal space. Seven days after injection, sections were prepared, and survival, migration and also arrangement of transplanted cells were investigated by immunohistochemistry. Results: Three days after sodium iodate injection, the pathological changes such as increased autofluorescence, hypertrophy and multinuclearity in retinal pigmented epithelium were observed. Histological investigation showed disorganization of outer segment of photoreceptors and also changes in the retinal pigmented epithelium. Immunohistochemsitry findings, seven days after injection, showed that transplanted cells survived in subretinal space and could migrate into both retinal pigmented epithelium and the retinal layer and finally integrated with host tissue. Conclusion: Due to accessibility, mesenchymal stem cells are regarded as a good source for transplantation. Potential of differentiation to neural linage and also survival ability and migration of these cells after transplantation could be regarded as a new way for the treatment of retinal degenerative diseases. Keyword: Neurosphere cells, Bone marrow stromal stem cells, Sodium iodate, Age related macular degeneration.