پديد آورندگان :
متوسلي، تهمينه نويسنده , , دفتريان، نارسيس نويسنده , , رضايي كنوي، مژگان نويسنده , , احمديه، حميد نويسنده , , باقري، ابوذر نويسنده , , حسيني، باقر نويسنده , , انصاري، شبنم نويسنده , , سهيلي ، سهيلا نويسنده ,
كليدواژه :
Anti-CTGF , تزريق داخل ويتره , موش بزرگ آزمايشگاهي , بيماري هاي چشمي
چكيده فارسي :
هدف: فاكتور رشد بافت همبند (CTGF: Connective Tissue Growth Factor) داراي خاصيت پروفيبروتيك در بيماري هاي مختلف چشم مانند رتينوپاتي ديابتيك پروليفراتيو (PDR: Proliferative Diabetic Retinopathy) و پروليفراتيو ويترئورتينوپاتي (PVR: Proliferative Vitreoretinopathy) مي باشد. در مطالعه آزمايشگاهي (In vitro) نشان داديم كه μg/ml 10 از آنتي بادي عليه CTGF به همراه 8/0 ميلي گرم از بواسيزوماب در محيط كشت سلولي RPE (Retinal pigmented epithelium) سبب كاهش بروز ژن و پروتيين CTGF مي گردد. در مطالعه حاضر كه يك مطالعه In vivo مي باشد به بررسي حداكثر دوز ايمن Anti-CTGF در زجاجيه (IVAC: Intravitrealinjection of anti-CTGF) در موش بزرگ آزمايشگاهي (Rat) مي پردازيم.
روش پژوهش: 45 موش بزرگ آزمايشگاهي رنگي (پيگمانته) بر اساس مقررات ARVO در چهار گروه، ميزان μl 2 از IVAC را در غلظت هاي μg/ml 10 و μg/ml 20 و μg/ml 50 و μg/ml 100 و يك گروه هم به عنوان گروه Sham، μl2 از نرمال سالين دريافت كردند. براي تمامي گروه ها الكترورتينوگرام (ERG) در روزهاي اول و هفتم و بيست و هشتم انجام شد. پس از كشتن موش ها، گلوب هاي انوكلئه شده مورد بررسي هاي پاتولوژي، ايمونوهسيتوشيمي (Immunohistochemistery، GFAP) و آزمايش TUNEL (Terminal transferase dUTP nick end-labeling assay) قرار گرفتند.
يافته ها: در شرايط اسكوتوپيك، آمپليتود موج b، مربوط به پاسخ گيرنده هاي نوري استوانه اي و آمپليتود موج b در شرايط Maximum Combined در گروه μg/ml 100 قبل از تزريق به ترتيب μv 2/71±89/111 و 58/55±57/178 بود كه به طور معناداري در روز 28 كاهش يافت (به ترتيب μv 59/52±31/79 و μv 61/41±73/128 با 05/0P<). در ساير گروه ها با مقادير كم تر IVAC و هم چنين در گروه شاهد، اين اثر مشاهده نشد. كاهش در موج Oscillatory Potential نيز در روزهاي 7 و 28 در گروه μg/ml 100 ديده شد (قبل از تزريق: μv 05/18±24/46 و روز هفتم: μv 95/15±03/30، 05/0P< و روز 28: μv 20/12±79/29 با 001/0P<). در بررسي بافت شناسي كاهش معناداري در تعداد سلول هاي گانگليوني شبكيه درگروه E مشهود بود. در آزمايش ايمونوهيستوشيمي GFAP reactivity، در هيچ يك از گروه ها نسبت به گروه كنترل اختلاف معناداري ديده نشد ولي در آزمايش TUNEL، آپوپتوزيس در لايه هاي داخلي شبكيه در گروه با غلظت μg/ml 100 مشهود بود.
نتيجه گيري: با توجه به نتايج حاصل از تست ERG، بافت شناسي و TUNEL به نظر مي رسد كه تزريق داخل زجاجيه Anti-CTGF با غلظت μg/ml 100 در موش بزرگ آزمايشگاهي براي شبكيه مضر مي باشد. غلظت μg/ml 50 و كم تر در مطالعات بعدي كه از لحاظ اثربخشي تزريق داخل زجاجيه Anti-CTGF انجام خواهد شد، توصيه مي گردد.
