مطالعه وضعيت متيلاسيون ژن‌هاي –NANOG1، RASSF1A، SFN، CASP8، WIF1 و CTSL2 در جمعيت بيماران مبتلا به سرطان پستان در ايران

Methylation Status of NANOG1, RASSF1A, SFN, CASP8, WIF1,CTSL2 Genes in Iranian Breast Cancer Patients

زمينه: غربالگري ماموگرافي براي تشخيص سرطان پستان در زنان جوان نتايج مثبت و منفي كاذب نشان مي‌دهد و بنابراين براي تشخيص سرطان پستان در مراحل ابتدايي نياز به يك روش غيرتهاجمي و كم هزينه ديگر نيز هست. تغييرات متيلاسيون DNA يكي از رايج‌ترين تغييرات مولكولي در سرطان‌هاي انساني و از جمله سرطان پستان است. بنابراين بررسي الگوي متيلاسيون بافت‌ها مي‌تواند در تشخيص زود هنگام سرطان مورد استفاده قرار گيرد. همچنين شباهت الگوهاي متيلاسيون يافت شده در نمونه‌هاي توموري و در پلاسما، كاربرد بالقوه شناسايي مولكولي سرطان پستان، بر پايه خون را نشان مي‌دهد. هدف از اين بررسي ارزيابي قابليت متيلاسيون پروموتور براي تشخيص باليني سرطان پستان است. مواد و روش‌ها: به منظور بررسي متيلاسيون پروموتور براي تشخيص باليني سرطان پستان 21 بافت توموري و 21 بافت نرمال مورد مطالعه قرار گرفتند. وضعيت متيلاسيون 6 ژن (NANOG1، RASSF1A، SFN، CASP8، WIF1 و CTSL2) با استفاده از روش PCR مختص متيلاسيون (MS-PCR) آناليز شدند. يافته‌ها: نتايج نشان داد ژن NANOG در 7/94 درصد نمونه‌هاي توموري و 100 درصد نمونه‌هاي سالم، ژن RASSF1A در 5/9 درصد بافت‌هاي توموري و صفر درصد بافت‌هاي سالم، ژن SFN در 3/14 درصد نمونه‌هاي توموري و 8/27 درصد نمونه‌هاي سالم، ژن CASP8 در 30 درصد نمونه‌هاي توموري و 5/23 درصد نمونه‌هاي سالم، ژن WIF1 در 80 درصد نمونه‌هاي توموري و 8/27 درصد نمونه‌هاي سالم و ژن CTSL2 در 6/28 درصد نمونه‌هاي توموري و 5/23 درصد نمونه‌هاي سالم متيله بود. آناليز داده‌ها توسط آزمون فيشر ارتباط معني‌داري بين اين نتايج نشان نداد (05/0 < P). نتيجه‌گيري: نتايج اين مطالعه نشان دادند كه وضعيت متيلاسيون 6 ژن براي افتراق دو گروه سرطاني و نرمال كافي نبوده است. اين مطالعه مشكلات متدولوژي (MSPCR) استفاده شده در ارزيابي ماركرهاي متيلاسيون براي ارزيابي وضعيت متيلاسيون به عنوان بيوماركرهاي تشخيصي را نشان مي‌دهد.

Background: Mammographic screening to diagnose the breast cancer showe false-negative and false-positive results in young women and therefore a non-invasive and low cost method is needed, to diagnose the breast cancer in the early stages. DNA methylation changes are the most common molecular changes in human cancers and including breast cancer. Therefore, The pattern of tissues methylation can be used in the early diagnosis of cancer. Also similar methylation patterns found in tumors and in plasma shows potential application of molecular detection of breast cancer, based on blood. The aim of this study was to assess the promoter methylation for the clinical diagnosis of breast cancer. Material and Methods: To examine the promoter methylation 21 tumor tissues and 21 normal tissues have been studied for clinical diagnosis of breast cancer. 6 gene methylation status (NANOG1, RASSF1A, SFN, CASP8, WIF1 and CTSL2) was analyzed by methylation specific PCR (MS-PCR). Results: The results show that NANOG gene was methylated in 94.7% of tumor specimen and 100% of normal specimen, RASSF1A gene was methylated in 9.5% of tumor specimen and 0% of normal specimen, SFN gene was methylated in 14.3% of tumor specimen and 27.8% of normal specimen, CASP8 gene was methylated in 30% of tumor specimen and 23.5% of normal specimen, WIF1 gene was methylated in 80% of tumor specimen and 27.8% of normal specimen, CTSL2 gene was methylated in 28.6% of tumor specimen and 23.5 % of normal specimen were methylated. Data analysis did not show a significant relationship between these results. (P > 0.05). Conclusion: The results of this study demonstrate that 6 gene methylation status was not enough to differentiate between the cancer and normal groups. This study demonstrates the methodological problems (MS PCR) which was used to assess the methylation markers to evaluate the methylation status as diagnostic biomarkers.