بررسي مقايسه اي توليد بذر مصنوعي گونه‏هايي از سرخ وليك (زالزالك) از راه كشت مريستم و رويان‏هاي پيكري

The comparative study of synthetic seed production in some species of Crataegus by meristem culture and somatic embryos

هدف: هدف از اين پژوهش توليد گياهان سالم و مطلوب دو گونه زالزالك‏ از طريق كشت مريستم و رويان زايي پيكري و تهيه بذر مصنوعي كه از نتايج زيست فناوري است، مي‏باشد. مواد و روش‏ها: بذرها، قطعات اندام‏هاي رويشي زايشي و جوانه‏هاي دو گونه زالزالك به‏حالت سترون در محيط MS جامد همراه هورمون‏هاي اكسيني (2,4D ، NAA، IAA)، سيتو كينيني (KIN, Zeatin،BAP ) و  GA3 در شرايط استريل به مدت؟؟؟ و در چند تكرار؟؟؟كشت شدند. كپسولي كردن نمونه‏ها با آلژينات سديم و كلرور كلسيم انجام شد. نتايج: بهترين جدا كشت‏هاي كالوس زا، جدا كشت‏هاي برگي و مريستم جوانه‏ها در محيط MS جامد همراه با غلظت‏هايي از اكسين‏ها و سيتو كينين‏ها بودند. رويان نماها و به‏ويژه رويان‏ها اغلب از جدا كشت‏هاي برگي و با واكشت كالوس‏هاي رويان زا در محيط MS جامد همراه با هورمون‏هاي اكسين – سيتوكينين و حضور مختصر NaCl ايجاد شدند. جوانه‏هاي جانبي از اوايل پاييز و اواخر اسفند براي توليد بذرهاي مصنوعي مناسب‏تر بودند. براي توليد بذرهاي مصنوعي از پوشش 3 درصد آلژينات سديم و 1 درصد كلرور كلسيم استفاده شد. براي ذخيره سازي دانه هاي مصنوعي دماي 4 درجه سانتي‏گراد و براي رويش اين بذرها دماي 1± 24 درجه سانتي‏گراد مناسب بودند. نتيجه‏گيري: مشكلاتي براي رويان­زايي پيكري گونه‏هاي مورد مطالعه وجود دارد. نوع و مقدار هورمون‏ها بر كالزايي و تشكيل رويان نماها و رويان‏ها بسيار موثر است. زمان برداشت جوانه‏ها براي توليد بذرهاي مصنوعي نيز اهميت زيادي دارد. همراه كردن جوانه‏ها با محيط MS و كپسولي كردن آن‏ها با آلژينات سديم مناسب است.

Aim: The aim of this studyishealthy and desirable plants production of two Crataegus species using meristem culture and somatic embryogenesis and synthetic seed preparation that is a biotechnological result. Material and methods: Strile seeds, vegetative generative organs pieces and the buds of two Crataegus species (Crataegus pseudoheterophylla and C. microphylla)were cultured on solid MS medium with auxin hormones (IAA, NAA and 2, 4 D), cytokinins (KIN, BAP, Zeatin) and GA3 under sterile conditions. Samples were capsulated by sodium aglinate and calcium chloride. Results: Leaves, apical meristems and axillary bud meristems explants were the best for callus production in solid MS medium with some concentration of auxins and cytokinins. Embryoids and especially embryos were almost obtained from leaf explants or sub culturing of embryogenic callus in solid MS medium contains auxins, cytokinins and a little of NaCl. Early autumn and late winter axillary buds were suitable for synthetic seed production. Sodium alginate %3 and calcium chloride %1 were used as a capsule for synthetic seed production. For artificial seed storage 4°C and for germination of these seeds 24 ± 2°C were suitable.   Conclusion: There are some difficulties for somatic embryogenesis in two studied Crataegus. Hormones type and dosage are very important and effective on callus, embryoids and embryos production. Buds harvesting time is also important for synthetic seed production. The supplements of buds with MS medium and capsulation those with sodium alginate are favorable.