جداسازي مولكولي سالمونلا از مدفوع گربه‌هاي ولگرد شهر تهران با استفاده از روش زنجيره‌اي پلي مراز

Molecular isolation of Salmonella from faeces of the street cat by PCR method

اين بررسي به منظور اطلاع از ميزان آلودگي مدفوعگربه هاي ولگرد سطح شهر تهران به سالمونلا طراحي و انجام گرديد. جهت نيل به اين هدف از 100 قلاده گربه ولگرد كه توسط افراد حامي حيوانات از مناطق مختلف شهر تهران به كلينيك هاي دامپزشكي منتخب ارجاع داده شده بودند، نمونه برداري از مدفوع صورت پذيرفت. از سه روش كشت معمول، آزمون هاي سروتايپينگ و روش-هاي مولكولي واكنش هاي زنجيره اي پليمراز تك گانه و چندگانه جهت تشخيص جنس و تعيين سرووار بهره گرفته شد. نمونه ها پس از قرار گرفتن در انكوباتور ?C37 به مدت 24 ساعت به محيط هاي كشت انتخا بي نظير رامباخ و در صورت ظهور كلني مشكوك، در محيط هاي افتراقي نظيرTSIكشت و پس از 24 ساعت ديگر نتايج بررسي گرديد. در روش كشت، از يك قلاده بچه گربه ماده حدودا 2 ماهه نژاد مخلوط مبتلا به اسهال خوني و دهيدراسيون شديد باكتري سالمونلا جداسازي گرديد. نمونه ي مدفوع اين بيمار و تمامي موارد مشكوك حاصل از كشت را با استفاده ازروش هاي مولكولي (M-PCR و PCR)مورد ارزيابي قرار داده، كه در نتيجه اين اقدام يك مورد ديگر باكتري سالمونلا مربوط به يك قلاده گربه ماده يك ساله بدون علايم باليني شناسايي گرديد. با توجه به نتايج آزمايشات سروتايپينگ، هر دو جدايه در گروه سرمي D1 قرارگرفته اند. نظر به اينكه سالمونلا انتريتيديس يكي از مهمترين علل مسموميت غذايي در انسان مي باشد و منابع دامپزشكي آن شامل گله هاي طيور و محصولات كشتارگاهي مي باشد، به نظر مي رسد جداسازي دو مورد سالمونلا به علت دسترسي گربه‌هاي ولگرد با چنين منابعي مي باشد.

This study was performed for detecting enteric Salmonella in stray cats in Tehran. Stool samples obtained from 100 stray cats were referred to small animal clinics by SPCA members from different part of Tehran. Routine culture, serotyping test and molecular methods (PCR and M-PCR) were done for evaluating of genius and serovars of bacteria. Samples were placed in 37 ?C for 24 hours in selective media such as Rambach medium. After the colonies appeared, they cultured in differential media such as TSI. Results recorded after 24 hours later. Only one sample showed Salmonella Spp. in culture method from a 2 month old kitten with hemorrhagic enteritis and severe dehydration. This sample and other suspected cases were tested by PCR and M-PCR subsequently. We found another case of Salmonella enteritidis from a female one-year-old cat without any clinical signs. Serotyping tests showed both cases belong to groupD1. Although Salmonella enteritidis is an important factor in human gastroenteritis and recorded from poultry farms and products, it is supposed to detecting this kind of Salmonella are created after exposing to related resources.