بررسي شيوع مهمترين سروگروپ‌هاي اشريشياكلي انتروتوكسيژنيك و فيمبريه 5F در گوساله‌هاي اسهالي زير 5 روز در استان‌هاي البرز و قزوين

Survey on prevalence of main serogroups and F5 fimbria gene in Enterotoxigenic Escherichia coli isolates from diarrheic calves under five days in Alborz and Qazvin provinces

اشريشياكلي(E.Coli) فلور طبيعي مجاري گوارشي بيشتر جانوران و نيز انسان است اما برخي سويه‌هاي پاتوژنيك اشريشياكلي باعث انواعي از بيماري‌هاي رودهاي و خارج روده اي مي‌شوند. سروتيپ اشريشياكلي انتروتوكسيژنيك (ETEC) شايع ترين علت بروز سندروم اسهال در نوزادان حيوانات مزرعه است. مهمترين فاكتور هاي مرتبط با بيماري زايي در ETEC، فيمبريه است كه به عنوان عامل چسبنده و انتروتوكسين هاي ترشحي مي باشد. مهمترين فيمبريه هاي معمول در گوساله‌ها (99K) 5Fو 41F مي باشد و بيشترين موارد 99K جداشده متعلق به سروگروپ هاي 8O، 9Oو 101O است. هدف از انجام اين مطالعه، بررسي ميزان فراواني ژن‌هاي مربوط به سروگروپ‌هاي مختلف (101O، 9O، 8O و...) و فيمبريه 99Kدر گوساله‌هاي اسهالي زير 5 روز است. هر نمونه بر روي محيط مك كانكي كشت و از هر پليت، سه كلني از باكتري به صورت جداگانه كشت داده شد، همچنين تمامي نمونه‌ها از نظر فراواني ژن 99K و در ادامه نمونه‌هايي كه پس از بررسي ژن تايپ 101O منفي بودند به ترتيب اهميت، از نظر تايپ 8O، 9O و 115O با آزمايش Multiplex PCR بررسي شدند. نتايج اين بررسي نشان مي دهد درصد فراواني بدست آمده از سروگروپ هاي 8O، 9O، 101O، 115O و فيمبريه ي 99K در گوساله‌هاي اسهالي به ترتيب 7/18%، 3/9%، 3/56%، 8/7% و 3/9% و بيشترين فراواني فيمبريه 99K بين سروگروپ‌ها در سروگروپ 101O با 3/83% مي باشد.

Escherichia coli is the natural inhabitant of gastrointestinal tract of animals and also human beings. However, some pathogenic strains of E. coli cause variety of intestinal and extra intestinal diseases. Enterotoxigenic E. coli (ETEC) is the most common cause of diarrhea syndrome in neonatal farm animals and thus is one of the significant causes of economic losses in herds. Fimbriae are the most important factor associated with pathogenicity of ETEC which carry adhesions and work as secretory enterotoxin. The most common fimbriae in calves are F5 (K99) and F41. K99 isolates most commonly belong to serogroups O8, O9 and O101. The objective of this study was to investigate the frequency of genes associated with different serogroups (O8, O9, O101, etc) and K99 fimbriae in fecal samples obtained from calves under 5 days of age. Samples were cultured on MacConkey’s agar, then from each palate, three colonies were cultured separately. Strains were screened for K99 genes and then for O101 by PCR assay, if negative results were obtained, Multiplex PCR was performed to identify genes associated with serogroups O8, O9 and O115. In this study, the frequency of genes associated with O8, O9, O101, O115 serogroups and K99 fimbriae in diarrheic calves were 18.7%, 9.3%, 56.3%, 7.8% and 9.3%, respectively. K99 fimbriae occurred at higher frequencies in O101 serogroup and were detected in 83.3% of those strains.