پديد آورندگان :
رشيدي منفرد، سجاد نويسنده RASHIDI MONFARED, sajad , نقوي، محمدرضا نويسنده , , يزدي صمدي، بهمن نويسنده , , عليزاده، هوشنگ نويسنده Alizadeh, Houshang , يانگ ، كي نويسنده , , لوندگرن، اينلي نويسنده , , برودليوس ، پيتر نويسنده ,
كليدواژه :
آرتميزينين , بيان موقت , GC , عامل هاي رونويسي , MS
چكيده فارسي :
بيان موقت در بافت برگ با ناقلهاي دوتايي روش سريعي براي توليد پروتئين در گياهان است. عامل هاي رونويسي باعث تغيير بيان همزمان چند ژن مي شوند. به همين دليل مي توان از آنها براي اصلاح صفات كمي مانند سوخت وسازگر (متابوليت)هاي ثانويه كه با چند ژن كنترل مي شوند، استفاده كرد. گياه Artemisia annua گياهي يك ساله، بومي آسيا و به احتمال بسيار زياد چين است و يكي از مهم ترين سوخت وسازگرهاي دارويي يعني تركيب سسكوييترپن آرتميزينين را كه داراي خواص ضدمالاريايي و ضدسرطاني بالايي است توليد ميكند. براي بررسي ميزان تاثير عامل هاي رونويسي مختلف مورد بررسي (سه عامل رونويسي متعلق به خانواده WRKY و دو عامل رونويسي متعلق به خانواده MYB) و آنزيم هاي DBR2 و OPR3 روي ميزان بيان ژنهاي مسير زيست ساخت (بيوسنتز) آرتميزينين و توليد سوخت و سازگرهاي حدواسط، از روش بيان موقت با اعمال نفوذپذيري تدريجي آگروباكتريوم (آگرواينفيلتريشن) استفاده شد. ژنهاي مختلف مورد بررسي از برگ گياه A. annua استخراج و در آغاز در ناقل pJET1.2 همسانه (كلون) و آن گاه در حامل بياني ويروسي pEAQ-HT همسانهسازي شده و در برگ هاي دو كموتايپ (chemotype) وحشي ايران و آنامد (anamed) بهصورت موقت بيان شدند. نتايج تجزيه سوخت وسازگرهاي مسير زيست ساخت آرتميزينين با استفاده از دستگاه GC-MS نشان داد كه عامل هاي رونويسي مورد بررسي نقش مهمي در توليد دو سوخت وسازگر AA و DHAA در گياهان آگرواينفيلتره شده نسبت به كنترل داشتند. اين نتايج نشان ميدهد كه عامل هاي رونويسي بالا قادر به تنظيم رونويسي ژنهاي دخيل در زيست ساخت آرتميزينين هستند.