تاثير عصاره متانولي بخش‌هاي هوايي گياه درمنه خزري(Artemisia annua) بر تكثير و مرگ سلول‌هاي سرطاني لوسمي لنفوبلاستيك حاد رده‌هاي Nalm-6 و Reh

The effect of methanolic extract of aerial parts of Artemisia annua on proliferation and apoptosis of acute lymphoblastic leukemia cell lines, Nalm-6 and Reh

چكيده سابقه و هدف لوسمي لنفوبلاستيك حاد(ALL)، شايع‌ترين بدخيمي در كودكان محسوب مي‌شود. با توجه به اثرات جانبي شيمي درماني، امروزه استفاده از تركيبات طبيعي براي درمان بدخيمي‌ها مورد توجه بسيار قرار گرفته است. اثر مهاري آرتميسيا آنوا(درمنه خزري) بر روي چندين رده سلولي سرطاني گزارش شده است. هدف از اين مطالعه، بررسي اثر سميت اين عصاره بر رده‌هاي سلولي لوسمي لنفوبلاستيك حاد بود. مواد و روش‌ها در اين مطالعه تجربي، سلول‌هاي Nalm-6 و Reh كشت داده شدند و سپس با غلظت‌هاي مختلف عصاره گياه تيمار و با كمك آزمون MTT ، درصد سلول‌هاي زنده بعد از 48 و 72 ساعت بررسي شد. از آزمون فلوسيتومتري Annexin V-FITC و سنجش فعاليت كاسپاز 3 جهت ارزيابي القاي آپوپتوز استفاده شد. آناليز آماري داده‌ها با استفاده از آزمون one-way ANOVA انجام گرفت. يافته‌ها نتايج حاصل از آزمون MTT نشان داد كه IC50 عصاره پس از 48 ساعت در رده Nalm-6 ، µg/mL 90 و در رده Reh ، µg/mL 70 مي‌باشد، به همين ترتيب پس از 72 ساعت نيز داراي اثر كشندگي بالايي به نسبت گروه كنترل بود(001/0 p < ). نتايج آزمون فلوسيتومتري حاكي از افزايش آپوپتوز با غلظت µg/mL 40 عصاره مي‌باشد(05/0 p < ). افزايش قابل توجه فعاليت كاسپاز 3 در سلول‌هاي تيمار شده نيز مشاهده شد(01/0 p < ). نتيجه گيري با توجه به نتايج به دست آمده، عصاره متانولي بخش‌هاي هوايي گياه آرتميسيا آنوا سبب مهار رشد قابل توجه سلول‌هاي رده Nalm-6 و Reh شد.

Abstract Background and Objectives Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is the most common malignancy among children. The use of natural compounds has invoked a lot of interest in treatment of malignancies due to the adverse effects of chemotherapy treatment. Artemisia annua was reported to show cytotoxic effects on various cancer cell lines. In this study, cytotoxic effects of Artemisia annua extract were investigated on acute lymphoblastic leukemia cell lines. Materials and Methods In this basic research, Nalm-6 and Reh cells were cultured and then treated with various concentrations of Artemisia annua extract; afterwards, the cell viability was evaluated using MTT assay for 48 and 72 h. The Caspase 3 activity assay and flow cytometry following Annexin V and Propidium iodide staining were used to assess apoptosis. Statistical analysis was evaluated by one-way ANOVA test. Results A. annua extract showed IC50 of 90 µg/ml on Nalm-6 and IC50 of 70 µg/ml on Reh cells after 48 h; the cytotoxic effect after 72 h was noticeable (p < 0.001). Flow cytometry results also show that A. annua extract concentration of 40 µg/ml increases the percentage of apoptotic cells compared with control groups (p < 0.05). Significant increase in Caspase 3 activity was observed after treatment with Artemisia annua compared with control groups (p < 0.01). Conclusions Our results show that methanolic extract of aerial parts of A. annua exerting cytotoxic and inhibitory effects on Nalm-6 and Reh cells.