بررسي موتاسيون مرتبط با سرطان‌زايي ژن آنتي ژن توموري بزرگ ويروس مركل سل پوليوما در بيماران مبتلا به سرطان پوست

Molecular Detection of Large Tumor Antigen Mutations of Merkel Cell Polyomavirus in Patients with Skin Cancer

سابقه و هدف: كارسينوم سلول بازال و كارسينوم سلول سنگفرشي دو شكل اصلي از سرطان پوست غير ملانومي مي‌باشند. تحقيق هاي اخير، وجود MCPyV در بافت‌هاي توموري سلول مركل را تاييد مي‌نمايد. لذا هدف از تحقيق حاضر، بررسي وجود ويروس در نمونه‌هاي بافت توموري و هم چنين نقش موتاسيون‌ هاي ناحيه ژن بزرگ (LT Ag) ويروس كه با خواص انكوژنيك آن در ارتباط مي‌باشد، در نمونه‌هاي مثبت مراجعه كننده به بيمارستان رازي تهران در طي سال 95- 1394 بوده است. مواد و روش‌ها: در مطالعه بررسي - مقطعي حاضر، تعداد 55 نمونه بافتي شامل 30 نمونه BCC، 10 نمونه SCC و 15 نمونه غير مبتلا (سالم) جمع‌آوري و استخراج DNA آ‌ن‌ها انجام شد. واكنش Real Time PCR كمّي به منظور تشخيص نمونه‌هاي مثبت و سپس واكنش PCR به منظور شناسايي موتاسيون انجام و در نهايت توالي‌يابي انجام شد. يافته‌ها: ژنوم ويروس MCPyV تنها در 10% از نمونه‌هاي BCC شناسايي شد درحالي كه در نمونه‌هاي SCCديده نشد. هم چنين رابطه معني‌داري بين جدا‌شدن ويروس MCPyV و متغير‌هاي سن، جنس و مرحله بيماري ديده نشد. نتايج توالي‌يابي نيز موتاسيوني كه منجر به ايجاد كدون پايان، كوتاه‌شدن LTAg و يا تغيير قالب قرايت شود را در بين جمعيت مورد مطالعه نشان نداد. نتيجه‌گيري: يكي از فاكتورهاي دخيل در ايجاد سرطان، عفونت‌هاي ويروسي است. اگرچه مطالعه هاي گوناگون بر نقش موتاسيون‌هاي ايجاد شده در ناحيه N ترمينال آنتي ژن LT با تومورزاي ويروس تاكيد دارد ليكن در مطالعه حاضر هيچ موتاسيون ايجاد كننده كدون خاتمه و يا تغيير قالب قرايت مشاهد نشده است. بنابر اطلاع ما اين اولين تحقيق بر روي شيوع ويروس MCPyV با سرطان پوست غير ملانومي در بيماران ايراني است هرچند كه به مطالعه هاي با تعداد نمونه‌هاي بيش تر ضروري مي‌باشد.

Aim and Background: Basal cell carcinoma (BCC) and squamous cell carcinoma (SCC) are two forms of non-melanoma skin cancer. Recent research indicated that Merkel cell polyomavirus (MCPyV) is associated with Merkel cell Carcinoma (MCC). So, the aim of current study was presence of MCPyV in the tumor tissue and role of large T antigen (LT Ag) mutations that associated with MCPyV oncogenic properties in LTAg region in positive samples that referred to Razi Hospital in Tehran within 2015-2016. Materials and Methods: In this cross-sectional study, 55 tissue samples containing: 30 BCC, 10 SCC and 15 individual healthy samples were collected and genomic DNA was extracted. To finding positive samples, quantitative Real-Time PCR was done and the full-length of Large T antigen region was amplified and sequenced directly for detection of probable mutations. Results: MCPyV genome was detected only 10% of BCC samples. There is no correlation between sex (P-Value=0.33), age (P-Value=0.5), or stage of cancer (P-Value=0.25) and the presence of MCPyV genome in our populations of study. Conclusion: Viral infections are one of the factors in causing cancer. Although, several studies were reported that frame shift mutation at the N-terminus of LT Ag region is associated with tumorigenesis of the virus, but in current study, no any mutations causing stop codons or frame shifting were observed. As our knowledge this is the first study presenting data on the prevalence of MCPyV in non-melanoma skin cancer from Iranian patients. However, further studies with more samples are necessary.