اثر عصاره هيدروالكلي قارچ قيفي(Cantharellus cibarius) بر تغييرات بيان ژن‌هاي NT3 و NGF پس از كمپرسيون عصب سياتيك در رت

Effects of Cantharellus Cibarius HydroAlcoholic Extract on NT3, NGF Gene Expression after Sciatic Nerve Compression in Rats

مقدمه: بيان فاكتورهاي نوروتروفيك كه باعث افزايش بقاء و ترميم نورون ها مي شوند، بيانشان در پاسخ به آسيب عصب تغيير مي يابد. قارچ قيفي(Cantharellus cibarius) داراي اثرات آنتي اكسيداني و ضدالتهابي است؛ لذا اين پژوهش با هدف تعيين اثرات عصاره هيدروالكلي قارچ قيفي و تأثير آن بر روي ميزان بيان ژن NT3 و NGF پس از كمپرسيون عصب سياتيك در رت انجام شده است. روش بررسي: ابتدا عصاره هيدروالكلي قارچ قيفي با روش سوكسله تهيه شد. در اين مطالعه تعداد 36 سر رت نر نژاد ويستار با وزن 300-250 گرم به صورت تصادفي به سه گروه 12 تايي شامل گروه هاي كنترل، كمپرسيون (روزهاي 1، 7، 14 و 28) و تيمار (روزهاي 1، 7، 14 و 28) تقسيم شدند. گروه هاي تيمار با دوز mg/kg75 هيدروالكلي قارچ قيفي تيمار شدند و در گروه كنترل تزريق سرم فيزيولوژي جهت ايجاد استرس انجام شد. در گروه هاي كمپرسيون و گروه هاي تيمار عصب سياتيك پاي راست به مدت 60 ثانيه تحت كمپرسيون قرار گرفت. اولين تزريق عصاره در گروه هاي تيمار به صورت داخل صفاقي بلافاصله بعد از كمپرسيون عصب و دومين تزريق 7 روز بعد انجام شد، سپس از نخاع ناحيه كمري در روزهاي 1، 7، 14 و 28 در گروه هاي كمپرسيون و تيمار نمونه برداري گرديد. از قطعات نخاعي نمونه برداري شده Total RNA استخراج و cDNA سنتز گرديد و سپس بررسي تغييرات بيان ژن NT3 و NGF به وسيله روش RTPCR در نمونه هاي مورد آزمايش انجام شد. داده ها توسط آزمون توكي و به كمك نرم افزار SPSS 16 تجزيه و تحليل شد. نتايج: نتايج نشان داد كه ميزان بيان ژن NT3 و NGF در گروه كمپرسيون نسبت به شاهد معني دار بوده است (0.05p<). همچنين ميزان بيان ژن NT3 و NGF گروه هاي تيمار با عصاره هيدروالكلي، در مقايسه با گروه كمپرسيون معني دار بود(0.05>p). نتيجه گيري: به نظر مي رسد قارچ قيفي به علت داشتن اثرات آنتي اكسيداني و ضدالتهابي مي تواند از پيشرفت ضايعه و تخريب عصب جلوگيري كرده به نحوي كه بيان ژن NT3 و NGF در گروه تيمار در مقايسه با گروه كمپرسيون افزايش پيدا كرده است؛ بنابراين اثرات ترميمي اين قارچ از طريق مكانيسم افزايش بيان ژن NT3 و NGF عمل نموده است.

Introduction: The expression of neurotrophic factors, which cause increasing of the survival and regeneration of neurons, is changed in response to nerve injury. Cantharellus cibarius has antioxidant and antiinflammatory effects. So, the aim of present study was to determine the effects of hydroalcoholic extract of Cantharellus cibarius on expression level of NT3 gene after sciatic nerve compression in rats. Methods: First the hydroalcoholic extract of Cantharellus cibarius was prepared by the Soxhlet method. In this study, 36 Wistar male rats , 250300 gr, were randomly divided into 3 groups consisted of 12 rats in each group. They were control, compression (1, 7, 14 and 28 days) and experimental (1, 7, 14 and 28 days) groups. Experimental groups were treated by 75 mg / kg of hydroalcoholic extract of Cantharellus cibarius and to induce the stress in control group, saline serum was injected. In compression and experimental groups, the sciatic nerve of right leg was compressed for 60 seconds. The first injection of extract in the experimental group was performed intraperitoneally and immediately after the compression and the second one was injected 7 days later. Then, the sampling was performed of lumbar spinal cord on 1, 7, 14 and 28 days in compression and experimental groups and the total RNA was extracted from the spinal cord segments, cDNA was synthesized and after that the alteration of gene expression of NT3 and NGF samples was studied real time PCR method and Data were analyzed by Tukey test and SPSS 16 softwere. Results: The expression of NT3 and NGF showed significant increase in compression group compared to the control group, (p<0.05). Also, it is shown significant increase of expression of NT3 and NGF in the experimental group compared to the compression group, (p<0.05). Conclusion: According to these findings, hydro alcoholic extract of Cantharellus cibarius has an anti oxidant and antiinflammatory effects that increase the regeneration process expression of NT3 and NGF in the experimental group was increase compared with the compression group.