تشخيص مولكولي سروتيپ B / 793 ويروس برونشيت عفوني در جوجه هاي گوشتي اطراف شيراز

Detection of Infectious Bronchitis Virus B/793 Serotype in Broiler Chicken in Shiraz by Molecular Methods

بيماري برونشيت عفوني ماكيان، يك بيماري حاد و به شدت واگير دستگاه تنفسي و ادراري- تناسلي مي باشد كه منجر به تلفات و خسارات سنگين به صنعت طيور كشور مي گردد. به منظور بررسي بيماري برونشيت در گله هاي گوشتي مرغداريهاي داراي علائم تنفسي اطراف شيراز، از 30 واحد مرغداري گوشتي مختلف، نمونه هاي بافت ناي و ريه از جوجه ها اخذ و با رعايت زنجيره سرما به آزمايشگاه منتقل شد. پس از آماده سازي و تزريق نمونه ها به تخم مرغ جنين دار SPF ، با استفاده از تست هماگلوتيناسيون براي ويروس هاي نيوكاسل و آنفلوانزا ارزيابي شدند. RNA ويروس با استفاده كيت تخليص RNA از مايع آلانتوئيك استخراج شد و با استفاده از پرايمر عمومي، ويروس برونشيت عفوني به روش RT-PCR مورد بررسي قرار گرفت و سپس با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي و با روش nested-PCR سروتيپ ماساچوست و B/793 شناسايي گرديدند. از مجموع نمونه هاي 30 واحد مرغداري بررسي شده در اين مطالعه، 6 واحد آن آلوده به برونشيت عفوني طيور بود كه در واكنش nested-PCR ، 4 مورد از نظر سروتيپ B/793 مثبت بودند. در واحدهاي مورد بررسي واكسن B/793 مصرف نشده بود. لذا با توجه به حضور سروتيپ B/793 در مرغداريهاي گوشتي، استفاده از واكسن اين سروتيپ، لازم به نظر مي رسد

Avian infectious bronchitis (IB) is an acute and contagious disease, and can be involved respiratory and urogenital systems. It can be cause high mortality with economic losses in industrial poultry. For IB detection, tracheal and lung tissue samples were collected from 30 broiler chicken farms with respiratory syndrome in Shiraz and transported to laboratory in cold chain. After preparation and inoculation of samples into embryonated SPF eggs, samples checked for avian influenza (AI) and Newcastle disease (ND) by hemagglutination (HA) test. Viral RNA was extracted from allantoic fluid by purification kit and RT-PCR optimized for detection infectious bronchitis virus (IBV) with global primers and used specific primers for detection of massachusetts and B/793 serotypes by nested-PCR. From 30 broiler chicken flocks, 6 flocks were positive for IBV, and 4 flocks were positive for B/793 serotype in nested-PCR. Association to this result, use of vaccine with B/793 serotype is necessary for chickens.