تعيين شرايط بهينه براي توليد تركيبات ضد قارچي از جدايه بومي باسيلوس سرئوس SB15

Optimizing conditions for the production of antifungal agents using the native Bacillus cereus SB15

سابقه و هدف: با توجه به گسترش عفونت هاي قارچي يافتن تركيبات ضد قارچي جديد ضروري است و گونه هاي مختلف باسيلوس به دليل ويژگي هاي زيستي منبع مناسبي براي اين منظور است. هدف اين مطالعه دست يابي به گونه هاي بومي باسيلوس با توان توليد تركيبات ضد قارچي مي باشد. مواد و روش ها: در اين مطالعه گونه هاي باسيلوس از نمونه هاي خاك تيمار شده با حرارت، جداسازي شده و با استفاده از روش انتشار ديسك اثر ضد قارچي مايع رويي حاصل از كشت براث آن ها بررسي شد. شاخص هاي MIC و MFC جدايه منتخب عليه دو قارچ استاندارد سنجيده شد و منحني رشد آن در مقادير مختلف دما و pH رسم شد. اثر pH، دما، زمان، منبع كربن و نيتروژن بر توليد تركيب ضدقارچي توسط جدايه منتخب بررسي شده و جدايه با استفاده از تست هاي بيوشيميايي و مولكولي تعيين هويت شد. نتايج: از 6 جدايه باسيلوس، 3 جدايه توانايي توليد تركيب ضد قارچ را داشتند و جدايه Bacillus cereus SB15 بيشترين توان ضد قارچي را نشان داد. شرايط بهينه توليد تركيب ضدقارچ توسط اين جدايه عبارت بود از: دمايC °37، 7pH=، 48 ساعت انكوباسيون و مانيتول و اوره به عنوان بهترين منابع كربن و نيتروژن. MIC و MFC تركيب ضدقارچي توليدي عليه آسپرژيلوس نيجر به ترتيب برابر 2 و 4 و عليه آسپرژيلوس فلاوس 4 و 16 ميلي گرم در ميلي ليتر به دست آمد. نتيجه گيري: در مجموع مي توان گفت باسيلوس جداسازي شده قابليت مناسبي جهت توليد تركيب ضدقارچ دارد و مي توان از آن در راستاي توليد تركيبات ضدقارچي جهت كنترل عفونت هاي قارچي و نيز كنترل قارچ ها در صنايع غذايي و محيط استفاده كرد.

Background: With regard to the occurrence of fungal infections, finding new antifungal agents is necessary. Due to its biologic properties Bacillus spp. are suitable sources for this purpose. The aim of this study was to find native bacillus species with potential of antifungal agent production. Material and Methods: In this experimental study, bacillus species were isolated from heattreated soil samples and following culturing in TSB, anti-fungal effects of their supernatants were determined by disc diffusion method. Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) levels of the selected strains were obtained against two fungal pathogens. Growth curve of the isolate was obtained in different pH and temperatures. The effects of pH, temperature, carbon and nitrogen sources on antibiotic production by the isolate were also investigated. This isolate was identified through biochemical and molecular tests. Results: Three out of six bacillus isolates were able to produce the antifungal agents, among them Bacillus cereus strain SB15 showed the most significant antifungal effects against a wide range of fungi. Optimized conditions for antibiotic production by this isolate were: temperature=37°C, pH=7, 48 h incubation and manitol and urea as the best carbon and nitrogen sources, respectively. The MIC and MFC of the produced antibiotic against Aspergillus niger were: 2 and 4 and against Aspergillus flavus 4 and 16 mg/ml, respectively. Conclusion: Based on the obtained results it may be concluded that this bacillus strain has optimum potential for antifungal agent production. The strain can be used for the control of fungal infections and also fungal growth in food industry and environment.